胃癌中DNA聚合酶β基因T889C突變的檢測(cè)和表達(dá).pdf

1、目的分析DNA聚合酶β(DNApolβ)基因在人胃癌細(xì)胞系和組織中表達(dá)水平，初步探討DNApolβ基因與胃癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為發(fā)現(xiàn)新的腫瘤標(biāo)志物，進(jìn)行早期胃癌篩查提供理論依據(jù)。方法(1)應(yīng)用PCR-SSCP及PCR-RFLP法檢測(cè)12個(gè)人胃癌細(xì)胞系和107例胃癌組織及其配對(duì)正常粘膜中DNApolβT889C突變，分析該突變頻率及分布規(guī)律。(2)構(gòu)建原核表達(dá)載體，表達(dá)DNApolβT889C的純合突變體及野生體，比較其生物學(xué)功能的異同。

2、(3)應(yīng)用半定量RT-PCR，檢測(cè)12個(gè)細(xì)胞系及大蒜素作用后BGC823中DNApolβ、Recql5基因的表達(dá)變化規(guī)律。結(jié)果(1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)12個(gè)胃癌細(xì)胞系中，來(lái)源為中國(guó)漢族人的四個(gè)胃癌細(xì)胞系，均為DNApolβT889C突變陽(yáng)性，而其余8個(gè)胃癌細(xì)胞系為陰性；107對(duì)胃癌組織中，10例癌組織DNApolβT889C突變陽(yáng)性，突變率為9.3％，配對(duì)正常粘膜組織突變陰性。該突變引起其編碼的259位氨基酸由亮氨酸變?yōu)榻z氨酸，導(dǎo)致其二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生