人參皂苷Rg3對(duì)HT-29結(jié)腸癌細(xì)胞株MMP-9和TIMP-1表達(dá)的影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　研究人參皂苷Rg3對(duì)HT-29結(jié)腸癌細(xì)胞株基質(zhì)金屬蛋白酶-9（matrix metalloproteinase9，MMP-9）mRNA和組織金屬蛋白酶抑制物-1（tissue inhibitor of metalloproteinase1，TIMP-1）mRNA表達(dá)的影響及采用MTT法測(cè)定人參皂苷Rg3對(duì)HT-29結(jié)腸癌細(xì)胞的抑制率，從而探討人參皂苷Rg3抑制腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移的機(jī)制。
　　方法：
　　體外

2、培養(yǎng)人結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29細(xì)胞。用高劑量（100μg/ml）、中劑量（50μg/ml）和低劑量（25μg/ml）人參皂苷Rg3培養(yǎng)HT-29細(xì)胞24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)。逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）方法檢測(cè)MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA表達(dá)情況。采用MTT法檢測(cè)人參皂苷Rg3對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率。統(tǒng)計(jì)采用SPSS14.0軟件包，兩因素析因方差分析，并多重比較。檢驗(yàn)水準(zhǔn)以P<0.05作為有顯著性差異，P<0.01

3、作為有非常顯著性差異。
　　結(jié)果：
　　1.RT-PCR方法檢測(cè)Rg3對(duì)HT-29細(xì)胞MMP-9 mRNA表達(dá)的情況，方差分析，24小時(shí)組：對(duì)照組與低、中劑量組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05、P>0.05）,與高劑量組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）；48小時(shí)組：對(duì)照組與低、中、高劑量組相比均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05、P<0.01、P<0.01）；72小時(shí)組：對(duì)照組與低、中、高劑量組相比均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

4、（P<0.01、P<0.01、P<0.01）。低劑量組：24小時(shí)組與48小時(shí)、72小時(shí)組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01、P<0.01），48小時(shí)組與72小時(shí)組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；中、高劑量組：24小時(shí)組與48小時(shí)組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），24小時(shí)組、48小時(shí)組與72小時(shí)組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01、P<0.01）。提示人參皂苷Rg3可以抑制HT-29細(xì)胞MMP-9 mRNA的表達(dá)，抑制作用

5、隨著劑量的增加及時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)。
　　2.RT-PCR方法檢測(cè)Rg3對(duì)HT-29細(xì)胞TIMP-1 mRNA表達(dá)的情況，方差分析，24小時(shí)組：對(duì)照組與低劑量組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），與中、高劑量組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01、P<0.01）；48小時(shí)組和72小時(shí)組：對(duì)照組與低、中、高劑量組相比均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01、P<0.01、P<0.01）。低劑量組：24小時(shí)組與48小時(shí)組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（

6、P>0.05），24小時(shí)組與72小時(shí)組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01），48小時(shí)組與72小時(shí)組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；中、高劑量組：24小時(shí)組與48小時(shí)組、72小時(shí)組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01、P<0.01），48小時(shí)組與72小時(shí)組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。提示人參皂苷Rg3可以促進(jìn)HT-29細(xì)胞TIMP-1 mRNA的表達(dá)，促進(jìn)作用隨著劑量的增加及時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)。
　　3.

7、MTT法檢測(cè)人參皂苷Rg3對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率，方差分析，24小時(shí)組：低劑量組與中劑量組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），低、中劑量組與高劑量組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01、P<0.01）；48小時(shí)組，低劑量組與中、高劑量組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01、P<0.01），中劑量組與高劑量組相比，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；72小時(shí)組：低劑量組與中、高劑量組相比均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01、P<0.01），中劑量

8、組與高劑量組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。低、中、高劑量組：24小時(shí)組與48小時(shí)組、72小時(shí)組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01、P<0.01），48小時(shí)組與72小時(shí)組相比，有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。說(shuō)明人參皂苷Rg3對(duì)HT-29細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用與藥物濃度及作用時(shí)間呈正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.抑制MMP-9的表達(dá)，促進(jìn)TIMP-1的表達(dá)，是人參皂苷Rg3抗腫瘤的機(jī)制之一。在一定的藥物濃度和作用