Toll受體在IBD致病機(jī)制中的作用.pdf

1、本研究分為二部分：第一部分：實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜TLR2、TLR4、TLR9的表達(dá)
　　 目的：觀察TLR2、TLR4、TLR9在實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織中的表達(dá),探討TLR2、TLR4、TLR9在IBD發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 方法：三硝基苯磺酸（TNBS）+乙醇灌腸制備實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠模型，肉眼及光鏡下觀察黏膜損傷程度及組織學(xué)變化；免疫組化S-P法觀察TLR2、TLR4、TLR9的表達(dá)，RT-PCR檢測(cè)其mRNA

2、相對(duì)含量；紫外分光光度法、黃嘌呤氧化酶法分別檢測(cè)組織中MPO、SOD含量的變化。
　　 結(jié)果：造模后結(jié)腸固有層及黏膜下層可見大量中性粒細(xì)胞、部分淋巴細(xì)胞和少許嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，并可見隱窩膿腫、肉牙組織及黏膜肌層增厚；與正常組相比，模型組腸黏膜MPO含量顯著上升（P<0.01），SOD含量明顯下降（P<0.01）；正常組TLR2、TLR4在黏膜下層及固有層炎性細(xì)胞胞膜和胞漿上有少量表達(dá)，TLR9未見表達(dá)，造模后腸組織TLR2、TL

3、R4、TLR9表達(dá)明顯增加（P 均<0.01），且見TLR2表達(dá)于腸上皮近腸腔側(cè)胞膜，TLR4表達(dá)于腸上皮近腸腔側(cè)胞膜及腺上皮近腺腔側(cè)胞膜；RT-PCR檢測(cè)三者mRNA相對(duì)含量增高，而正常對(duì)照組三者均未能檢出；TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)與MPO呈正相關(guān)，與SOD呈負(fù)相關(guān)(P 均<0.05)。
　　 結(jié)論：TNBS+乙醇模型實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)增強(qiáng)，可能與腸道的自我免疫損傷有關(guān)。
　　 第

4、二部分：不同微生態(tài)制劑應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)變化
　　 目的：觀察美常安、麗珠腸樂應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠后TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)的變化，探討其作用機(jī)制，并與柳氮磺胺吡啶（SASP）比較。
　　 方法：三硝基苯磺酸（TNBS）+乙醇灌腸制備實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠模型后，美常安、麗珠腸樂及SASP每日灌胃一次，10天后處死，肉眼及光鏡下觀察黏膜損傷程度及組織學(xué)變化；免疫組化S-P法觀察TL

5、R2、TLR4、TLR9的表達(dá)，RT-PCR檢測(cè)其mRNA相對(duì)含量；紫外分光光度法、黃嘌呤氧化酶法分別檢測(cè)組織中MPO、SOD含量的變化。
　　 結(jié)果：美常安及SASP治療后肉眼及組織學(xué)變化好轉(zhuǎn)，與模型組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 均<0.01），TLR2、TLR4、TLR9陽(yáng)性率下降，其mRNA含量降低，與模型組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 均<0.05），腸黏膜MPO含量下降，SOD含量上升，與模型對(duì)照組相比差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

6、義（P 均<0.01）。美常安及SASP兩組之間上述指標(biāo)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。麗珠腸樂治療后上述改變與模型組相比均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TLR2、TLR4、TLR9表達(dá)與MPO呈正相關(guān)，與SOD呈負(fù)相關(guān)，(MPO: r=0.515,0.386，0.537；P 均<0.01；SOD: r=-0.523，-0.474，-0.566；P 均<0.01)。
　　 結(jié)論：美常安及SASP應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型大鼠有效，可能于下調(diào)TLR2、TLR4、