高血壓藥物相關(guān)基因的突變檢測(cè)方法研究與應(yīng)用.pdf

1、個(gè)體化醫(yī)學(xué)作為一種新的醫(yī)學(xué)理念，是21世紀(jì)臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展趨勢(shì)，因其在病人使用藥物之前，對(duì)患者的某些藥物相關(guān)基因進(jìn)行檢測(cè)，不但可以降低患者醫(yī)療成本、改善藥物療效，同時(shí)還可以最大限度地避免藥物不良反應(yīng)的發(fā)生。針對(duì)以上考慮，本文借助焦磷酸測(cè)序平臺(tái)及PCR-電泳技術(shù)，對(duì)高血壓藥物相關(guān)基因及K-ras基因進(jìn)行檢測(cè)方法研究，主要工作如下:
　　第二章:ADRB1是β1腎上腺受體阻斷藥的作用靶點(diǎn)，ADRB1基因型突變雜合子(Gly389Arg)

2、和突變純合子(Arg389Arg)對(duì)β1受體阻斷藥較為敏感，而野生純合子(Gly389Gly)對(duì)藥物不敏感。對(duì)ADRB1基因型進(jìn)行檢測(cè)可幫助高血壓患者選擇合適的藥物。本文采用焦磷酸測(cè)序技術(shù)，檢測(cè)高血壓患者ADRB1基因多態(tài)性，并采用毛細(xì)管電泳測(cè)序技術(shù)對(duì)本文中建立的焦磷酸測(cè)序方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果顯示該方法檢測(cè)正確率為100％，可以作為科研或臨床中ADRB1 Arg389Gly基因多態(tài)性檢測(cè)的一種新的檢測(cè)方法。通過對(duì)184例高血壓患者的

3、ADRB1 Arg389Gly等位基因進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)，結(jié)果顯示Gly389Gly基因型的頻率為9.24％，Arg389Gly基因型的頻率為38.04％，Arg389Arg基因型的頻率為52.72％。
　　第三章:細(xì)胞色素氧化酶P4502C9(CYP2C9)(Ile359＞Leu359)突變導(dǎo)致CYP2C9酶活性在不同個(gè)體間存在差異。CYP2C9*3突變可降低E3174的血藥濃度，導(dǎo)致洛沙坦降壓效果減弱;CYP2C9*3突變可增加纈

4、沙坦和厄貝沙坦的血藥濃度，導(dǎo)致纈沙坦和厄貝沙坦降壓效果增強(qiáng)。對(duì)CYP2C9*3基因多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)可以指導(dǎo)高血壓患者合理用藥。本文采用焦磷酸測(cè)序技術(shù)，檢測(cè)高血壓患者CYP2C9*3基因多態(tài)性，并采用毛細(xì)管電泳測(cè)序技術(shù)對(duì)本文中建立的焦磷酸測(cè)序方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果顯示該方法檢測(cè)正確率為100％，可以作為科研或臨床中CYP2C9*3基因多態(tài)性檢測(cè)的一種新的檢測(cè)方法。通過對(duì)184例高血壓患者的CYP2C9*3等位基因進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示*1/*

5、3基因型的頻率為7.6％，*1/*1基因型的頻率為92.4％。而*3/*3基因型沒有出現(xiàn)，與前人的研究結(jié)果一致。
　　第四章:在人體內(nèi)，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)水平受控于ACE基因，不同的ACE基因型ACE水平的差異明顯，ACE基因多態(tài)性對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)的降壓效應(yīng)可產(chǎn)生顯著的影響，不同ACE I/D基因型的個(gè)體對(duì)特定ACEI類藥物的敏感性顯著不同。為了取得最好的療效，選擇藥物之前應(yīng)該明確患者的ACE I/D基

6、因型。本文采用PCR-電泳分析方法檢測(cè)高血壓患者ACE I/D多態(tài)性，并采用毛細(xì)管電泳測(cè)序技術(shù)對(duì)該P(yáng)CR-電泳分析方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果顯示該方法檢測(cè)正確率為100％，可以作為科研或臨床中ACE I/D基因多態(tài)性檢測(cè)的一種新的檢測(cè)方法。通過對(duì)184例高血壓患者的ACE I/D多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示I/I基因型頻率為44.57％，I/D基因型頻率為40.76％，D/D基因型頻率為14.67％。
　　第五章:表皮生長(zhǎng)因子受體(EG

7、FR)是西妥昔單抗(Cetuximab)的作用靶點(diǎn)，K-ras基因突變的患者使用西妥昔單抗的療效降低甚至無效。K-ras基因最常見的突變發(fā)生在在1號(hào)外顯子的第12位密碼子[35 G＞A、35G＞T、35G＞C、34G＞A、34G＞T、34G＞C]和第13位密碼子[38G＞A]上（約占突變的90％），另外，有約5％的突變位于2號(hào)外顯子的第61位密碼子上。檢測(cè)K-ras基因突變可以預(yù)測(cè)患者使用西妥昔單抗的療效。本文采用焦磷酸測(cè)序技術(shù)檢測(cè)K-