MicroRNAs與內(nèi)側(cè)顳葉癲癇發(fā)生發(fā)展機(jī)制的相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分:白細(xì)胞介素-1β和microRNA-146a在幼鼠模型和兒童內(nèi)側(cè)顳葉癲癇中的表達(dá)
　　目的:越來越多的證據(jù)表明神經(jīng)炎癥反應(yīng)在內(nèi)側(cè)顳葉癲癇(Mesialtemporal lobe epilepsy，MTLE)的發(fā)病機(jī)制有著重要的作用。本研究的目的是探討前炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）和轉(zhuǎn)錄后的炎癥相關(guān)的microRNA146a(miR-146a)在幼鼠MTLE模型和兒童MTLE患者

2、中的動(dòng)態(tài)表達(dá)情況。
　　方法:運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)、蛋白質(zhì)印跡和實(shí)時(shí)熒光定量PCR等方法來研究11日齡大鼠海馬中IL-1β和miR-146a的表達(dá)。分別檢測MTLE急性期、潛伏期和慢性自發(fā)發(fā)作期(分別為氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)癲癇持續(xù)狀態(tài)后的2h、3w和8w) IL-1β及miR-146a的表達(dá)情況，對照組海馬組織取相同的時(shí)間點(diǎn)檢測。用同樣的方法檢測兒童MTLE海馬和正常對照組海馬IL-1β和miR-146表達(dá)變化。
　　結(jié)果

3、:IL-1β和miR-146a在兒童和幼大鼠MTLE的不同時(shí)期表達(dá)不同。IL-1β和miR146a表達(dá)均明顯增加，但呈負(fù)相關(guān):IL-1β在MTLE急性期海馬組織中表達(dá)最高，而此時(shí)miR-146a的表達(dá)最低;在miR-146a表達(dá)最高的潛伏期，IL-1β表達(dá)則最低。在慢性自發(fā)發(fā)作期兩者的表達(dá)均增加，但增加的幅度低于急性期和潛伏期。
　　結(jié)論:我們首次研究了在氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)的幼鼠MTLE模型和兒童MTLE患者中miR-146a的

4、表達(dá)情況。證實(shí)IL-1β和miR-146a在兒童和幼大鼠MTLE模型中表達(dá)均增加。闡明了炎癥反應(yīng)在兒童和幼大鼠MTLE發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　第二部分:miR-124，miR-134，miR-132和miR-21在幼鼠模型和兒童內(nèi)側(cè)顳葉癲癇中的表達(dá)
　　目的:內(nèi)側(cè)顳葉癲癇（Mesial temporal lobe epilepsy，MTLE）的發(fā)病率高、藥物治療效果不好，嚴(yán)重危害人類健康。MicroRNAs是一類調(diào)節(jié)蛋白編碼

5、基因轉(zhuǎn)錄后表達(dá)的非編碼RNA，它們可能在MTLE的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。本研究的目的在于觀察在幼鼠MTLE模型三個(gè)時(shí)期和兒童MTLE患者中，腦組織特異性表達(dá)的miR-124和miR-134以及炎癥反應(yīng)相關(guān)的miR-132和miR-21的動(dòng)態(tài)表達(dá)改變。
　　方法:采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測25日齡幼鼠海馬中腦組織特異性表達(dá)的miR-124和miR-134以及炎癥相關(guān)的miR-132和miR-21的動(dòng)態(tài)表達(dá)改變。分別檢測MTLE大

6、鼠模型急性期、潛伏期和慢性自發(fā)發(fā)作期(分別為氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)癲癇持續(xù)狀態(tài)后的2h、3w和8w)的表達(dá)情況，對照組海馬組織取相同的時(shí)間點(diǎn)檢測。用同樣的方法檢測兒童MTLE患者和正常對照組海馬miR-124、miR-134、miR-132和miR-21表達(dá)改變。
　　結(jié)果:在大鼠MTLE模型的三個(gè)時(shí)期miR-124和miR-134的表達(dá)改變幾乎相同。在急性期和慢性自發(fā)發(fā)作期miR-132和miR-21表達(dá)均明顯上調(diào)，在潛伏期miR

7、-132表達(dá)上調(diào)，而miR21表達(dá)下降。四種miRs在兒童MTLE的海馬組織中表達(dá)均上調(diào)。
　　結(jié)論:miR-124和miR-134在大鼠MTLE模型抽搐相關(guān)的兩個(gè)時(shí)期及兒童癲癇患者海馬中表達(dá)顯著增加，表明miR-132和miR-21可能與MTLE發(fā)病相關(guān)。
　　第三部分:腦組織富含的miR-9及miR-138在幼鼠內(nèi)側(cè)癲癇模型及兒童內(nèi)側(cè)顳葉癲癇中的動(dòng)態(tài)表達(dá)改變
　　目標(biāo):近來microRNAs在MTLE發(fā)病中的新作用

8、引起了人們極大的關(guān)注。本研究旨在觀察腦組織中富含的miR-9和miR-138在幼鼠MTLE模型三個(gè)時(shí)期及兒童MTLE患者中的動(dòng)態(tài)表達(dá)改變。
　　方法:采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測25日齡幼鼠腦組織中miR-9和miR-138的表達(dá)情況。分別檢測急性期、潛伏期和慢性發(fā)作期(分別為氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)癲癇持續(xù)狀態(tài)后的2h、3w和8w) miR-9、miR-138的表達(dá)改變，對照組取相同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行檢測。用同樣的方法檢測兒童MTLE患者