咖啡酸苯乙酯對(duì)結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞JNK-paxillin信號(hào)通路的調(diào)控.pdf

1、目的：研究不同濃度下咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester CAPE)對(duì)結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞增殖的影響；觀察CAPE對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞JNK（c-Jun-N-terminal-kinase）信號(hào)傳導(dǎo)通路中相關(guān)基因樁蛋白（paxillin）表達(dá)的作用，尋找其作用靶點(diǎn)，進(jìn)一步闡明CAPE抗腫瘤作用的分子機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌細(xì)胞株（HT-29），取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，將其接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中，待

2、細(xì)胞完全貼壁后，吸棄原培養(yǎng)液；依次加入濃度為(0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、7.5μg/mL、10.0μg/mL)的CAPE；采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法觀察不同濃度的CAPE在不同時(shí)間段(24h、48h、72h)對(duì)HT-29細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率；提取總蛋白，以Western blot法檢測(cè)HT-29細(xì)胞中JNK及paxillin兩種蛋白在不同濃度的CAPE作用下表達(dá)量的改變。
　　結(jié)果：1.10μg/mL的CA

3、PE作用72h后對(duì)HT-29細(xì)胞的抑制率達(dá)60.03％，明顯高于2.5μg/mL作用72h后28.93%的抑制率(P<0.01)，也明顯高于10μg/mL作用24h后36.74%的抑制率(P<0.01)；2．CAPE在(2.5～10.0)μg/mL濃度范圍內(nèi)對(duì) HT-29細(xì)胞的生長(zhǎng)均有抑制作用,且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴關(guān)系和時(shí)間依賴效應(yīng)；3．隨著 CAPE濃度的增加，JNK、 paxillin蛋白表達(dá)水平降低，10μg/mL的CAPE作用2