甲狀旁腺素和鈣在促進(jìn)骨形成中的協(xié)同作用及機(jī)制研究.pdf

1、為了研究甲狀旁腺素(PTH)和鈣在促進(jìn)骨形成中的協(xié)同作用，分別以PTH純合子(PTH-/-)雄鼠與PTH雜合子(PTH+/-)雌鼠交配或以PTH+/-雄鼠與PTH-/-雌鼠交配而獲得PTH+/-和PTH-/-子代小鼠，并利用正常飲食(1.0％鈣、0.6％磷)或高鈣飲食(2.0％鈣、0.4％磷)喂養(yǎng)PTH+/-。和PTH-/-母鼠，觀(guān)察PTH缺乏和高鈣飲食致母乳成份改變及其對(duì)3周齡子代PTH+/-。和PTH+/-小鼠骨形成的影響。

2、 結(jié)果發(fā)現(xiàn)PTH基因敲除使哺乳期乳汁中鈣濃度和1，25(OH)2D3水平降低，但使乳汁中PTH相關(guān)肽(PTHrP)水平升高。與正常飲食母鼠相比，高鈣飲食的PTH+/-或PTH-/-母鼠乳汁中鈣濃度升高，1，25(OH)2D3和PTHrP水平則降低。正常飲食母鼠哺乳的PTH-/-子代小鼠血清鈣降低，血清磷升高。然而，高鈣飲食母鼠哺乳的PTH-/-子代小鼠的低鈣血癥和高磷血癥得以糾正。與正常飲食母鼠哺乳的子代小鼠相比，高鈣飲食母鼠哺乳的PT

3、H-/-和PTH-/-子代小鼠血清1，25(OH)2D3水平顯著下降。與同一母鼠哺乳的PTH+/-子代小鼠相比，PTH-/-子代小鼠骨密度、骨小梁容量和成骨細(xì)胞數(shù)都明顯下降；無(wú)論母鼠喂以正常飲食還是高鈣飲食，與PTH+/-母鼠哺乳的子代小鼠相比，PTH-/-母鼠哺乳的子代小鼠的骨密度、骨小梁容量和成骨細(xì)胞數(shù)都明顯下降；與正常飲食母鼠哺乳的子代小鼠相比，無(wú)論母鼠和子鼠的基因型是PTH+/-還是PTH-/-，高鈣飲食母鼠哺乳的子代小鼠的骨密

4、度、骨小梁容量和成骨細(xì)胞數(shù)都明顯增加，而破骨細(xì)胞數(shù)則明顯減少。骨形成指標(biāo)在高鈣飲食喂養(yǎng)的PTH+/-母鼠哺乳的PTH+/-子代小鼠最高，而在正常飲食喂養(yǎng)的PTH-/-。母鼠哺乳的PTH-/-子代小鼠最低。這些結(jié)果說(shuō)明PTH缺乏能夠明顯地降低成骨細(xì)胞骨形成，而這種降低不能完全被飲食鈣所糾正。PTH缺乏和高鈣飲食引起母乳成份的改變明顯地影響子代小鼠的骨骼發(fā)育。母乳中的鈣，而不是母乳中的1，25(OH)2D3和PTHrP水平，在影響子代小鼠的

5、骨骼發(fā)育中起有至關(guān)重要的作用。因此，我們得到的結(jié)論是PTH和鈣各自具有促進(jìn)骨形成作用，而且兩者在促進(jìn)成骨細(xì)胞骨形成中具有協(xié)同作用。 為了進(jìn)一步闡明PTH和鈣在促進(jìn)成骨細(xì)胞骨形成中協(xié)同作用的可能機(jī)理，利用正常飲食或高鈣飲食喂養(yǎng)PTH+/-CaSR+/-小鼠并進(jìn)行雌雄交配，分別獲得正常飲食或高鈣飲食PTH+/-CaSRl+/-母鼠哺乳的WT、PTH-/-和PTH-/-CaSR-/-子代小鼠。通過(guò)組織形態(tài)學(xué)分析和real timeRT

6、-PCR比較分析了3周齡PTH-/-CaSR-/-予代小鼠與同窩WT和PTH-/-子代小鼠的表型差異。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)：無(wú)論是正常飲食還是高鈣飲食母鼠哺乳，PTH-/-子鼠小梁骨容量和成骨細(xì)胞數(shù)均較WT小鼠明顯減低，而PTH-/-CaSR-/-子鼠小梁骨容量和成骨細(xì)胞數(shù)不僅較WT子鼠明顯減低，而且也較PTH-/-。子鼠進(jìn)一步減低。與正常飲食母鼠哺乳的子鼠相比，高鈣飲食母鼠哺乳的WT和PTH-/-子鼠小梁骨容量和成骨細(xì)胞數(shù)均明顯增加，而