FSH通過SATB1調(diào)控上皮性卵巢癌ES-2細(xì)胞的增殖和侵襲活性.pdf

1、目的：探討SATB1在卵泡刺激素誘導(dǎo)的上皮性卵巢癌ES-2細(xì)胞增殖和侵襲中的作用
　　 方法：以Real-time PCR檢測(cè)不同濃度卵泡刺激素（0,10,20,40,80mIU/ml）作用的上皮性卵巢癌ES-2細(xì)胞系中SATB1基因mRNA表達(dá)水平的變化。以80 mIU/ml 工作濃度的FSH和針對(duì)SATB1的siRNA作用于ES-2細(xì)胞，將實(shí)驗(yàn)對(duì)象分為4組：①siCon組，轉(zhuǎn)染si-陰性對(duì)照（si-Negative cont

2、rol）序列的實(shí)驗(yàn)組，對(duì)SATB1無干擾作用；②siSATB1組：轉(zhuǎn)染特異性RNA干擾下調(diào)SATB1表達(dá)的siSATB1序列；③FSH+siCon組：以FSH處理的siCon組；④FSH+siSATB1組：以FSH處理的siSATB1組。二甲基噻唑二苯基四唑溴鹽（MTT）比色法檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖情況。Western blot技術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞細(xì)胞周期蛋白（Cyclin D1），基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）的蛋白表達(dá)情況。Transwel

3、l侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞侵襲能力的變化。
　　 結(jié)果：⑴FSH+siCon組的細(xì)胞增殖能力明顯高于siCon組的細(xì)胞增殖能力，F(xiàn)SH+siCon組的Cyclin D1蛋白相對(duì)表達(dá)量0.90±0.08明顯高于siCon組的0.37±0.01（P均<0.01），提示FSH具有促進(jìn)ES-2細(xì)胞增殖的作用。⑵FSH+siCon組的穿膜細(xì)胞數(shù)（302 12）個(gè)明顯高于siCon組（139 19）個(gè)，F(xiàn)SH+siCon組的MMP-2蛋白相對(duì)表

4、達(dá)量0.40±0.01明顯高于siCon組的0.28±0.02，提示FSH具有促進(jìn)ES-2細(xì)胞侵襲能力的作用。⑶隨著FSH濃度的增高，SATB1mRNA的表達(dá)量逐漸增加，分別為1，1.66±0.04，1.79±0.21，2.31±0.03，以FSH濃度為80mIU/ml時(shí)最顯著（P<0.05）。⑷FSH+siSATB1組的細(xì)胞增殖能力明顯低于FSH+siCon組的細(xì)胞增殖能力，F(xiàn)SH+siSATB1組的Cyclin D1蛋白相對(duì)表達(dá)量0

5、.22±0.02明顯低于FSH+siCon組的0.90±0.08（P均<0.01）；FSH+siSATB1組的穿膜細(xì)胞數(shù)（52 16）個(gè)低于FSH+siCon組的（302 12）個(gè)，F(xiàn)SH+siSATB1組的MMP-2蛋白相對(duì)表達(dá)量0.15±0.00明顯低于FSH+siCon組的0.40±0.01（P均<0.01），F(xiàn)SH促進(jìn)ES-2細(xì)胞增殖和侵襲的能力由于SATB1基因表達(dá)的下降而被阻斷。
　　 結(jié)論：SATB1是FSH作用的