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文檔簡介
1、花色苷是一種在植物中普遍存在的酚類物質(zhì),是很多植物葉、花和果實呈現(xiàn)鮮艷顏色的原因。它具有抑制活性氧的生成和清除活性氧的生理活性。黑加侖含有許多對人體有益的礦物質(zhì)及維生素,富含花色苷。本文以黑加侖果渣中花色苷為研究對象,對其提取、純化、抗氧化性及穩(wěn)定性進行了研究,為該花色苷的工業(yè)化生產(chǎn)和使用提供了理論依據(jù)。
采用溶劑浸提及酶水解兩種不同的方法制備黑加侖花色苷。在溶劑浸提法中,通過單因素試驗確定乙醇為從黑加侖果渣中提取花色苷的最佳
2、溶劑。最佳提取條件由響應(yīng)面法分析確定為:提取溫度48℃、料液比1∶7,乙醇濃度為75%,浸提時間120min,提取液pH值2.0,黑加侖花色苷的提取率為85.28%。在酶水解法中,通過單因素和正交試驗,確定了黑加侖果渣花色苷提取的最佳工藝條件為:采用纖維素酶酶解,溫度50℃,時間100min,料液比1∶9,酶用量為原料質(zhì)量的1%,pH值5.0,黑加侖花色苷提取率86.63%。采用果膠酶酶解,溫度50℃,時間120min,料液比為1∶8,
3、酶用量為原料質(zhì)量的1.4%,pH值3.5,黑加侖花色苷提取率91.09%。并確定了使用果膠酶的提取效果好于纖維素酶。
采用柱層析法對花色苷提取物進行分離純化,對純化條件進行了探討,確定出X-5大孔樹脂為純化黑加侖果渣花色苷的最佳樹脂。最佳純化條件為:徑高比1∶20,吸附原液濃度34mg/mL,pH值2.0,吸附體積25mL,吸附流速1mL/min,水洗體積4BV,解吸液乙醇濃度60%,乙醇體積6BV,解吸流速1mL/min,花
4、色苷的收率為89.80%。純化后花色苷色價為原來的18.26倍。采用SephadexLH-20對初步純化的樣品進行進一步分離,并結(jié)合分光光度法、紙層析、HPLC對分離后樣品分析,結(jié)果表明樣品可分離出兩部分花色苷類物質(zhì)即樣品Ⅱ和樣品Ⅲ,其均含有兩個單花色苷,樣品Ⅱ中為矢車菊素-3-蕓香糖昔和飛燕草素-3-蕓香糖苷;樣品Ⅲ中為矢車菊素-3-葡萄糖苷和飛燕草素-3-葡萄糖苷。
采用羥基自由基、超氧陰離子、DPPH自由基、還原力、脂質(zhì)
5、體氧化反應(yīng)體系,檢測了黑加侖花色苷的體外抗氧化活性。結(jié)果表明黑加侖花色苷有較強的抗氧化活性,其中,凝膠樣品Ⅲ的效果優(yōu)于凝膠樣品Ⅱ,且兩者均高于樹脂純化后的花色苷。
對黑加侖花色苷進行最佳穩(wěn)定劑篩選和花色苷穩(wěn)定性比較研究試驗。選出三種穩(wěn)定劑及最佳使用量,即0.09%檸檬酸、0.08%甲硫氨酸和0.04%谷氨酸。通過穩(wěn)定性比較試驗,得出黑加侖花色苷在高溫、光照及弱堿情況下較不穩(wěn)定,加入穩(wěn)定劑后均能提高黑加侖花色苷的穩(wěn)定性,其中檸檬
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