二氮嗪預(yù)處理對大鼠海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧后細跑凋亡和c-Jun氨基末端激酶表達的影響.pdf

1、[目的] 探討線粒體內(nèi)膜ATP敏感性鉀通道(mitoKATP，通道)選擇性開放劑二氮嗪預(yù)處理對原代大鼠海馬神經(jīng)元遭受缺氧復(fù)氧損傷后細胞凋亡和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響以及可能的聯(lián)系。 [方法] 出生時間<24 h SD大鼠100只，體重5～6 g，斷頭取海馬組織。海馬神經(jīng)元培養(yǎng)至9～10 d，隨機分為5組：對照組(A組)、二氮嗪0 umol/L組(B組)、二氮嗪30 umol/L組(C組)

2、、二氮嗪100 umol/L組(D組)、mitoKATP通道特異性阻斷劑5-羥葵酸100 umol/L+二氮嗪100 umol/L組(E組)。各組細胞每天給二氮嗪預(yù)處理1 h，連續(xù)3 d后，接受缺氧4 h和復(fù)氧24 h。用四唑鹽(MTT)比色法分析海馬神經(jīng)元存活率，蛋白質(zhì)印跡法檢測Bcl-2、Bax和JNK蛋白表達水平的變化。 [結(jié)果] ①與A組比較，其余4組大鼠海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷后存活率明顯減少(P<0.01)；B

3、cl-2、Bax、JNK蛋白表達水平升高(P<0.01，P<0.05)； ②與B組比較，C和D組的存活率大大增加(分別P<0.05，P<0.01)，其中C組存活率升高5％，D組存活率升高12％；C和D組的Bcl-2蛋白表達明顯增高(分別P<0.05，P<0.01)，C組增加25％，D組增加100％；Bax和JNK蛋白表達程度下降(P<0.05)，其中Bax蛋白在C組減少22％，在D組減少42％，JNK蛋白在C組減少19％，在D組

4、減少35％；但B組與E組比較均無顯著性差異(P>0.05)； ③C組與D組各指標比較有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)。與C組比較，D組的細胞存活率增加7％，Bcl-2蛋白表達增高25％，Bax蛋白表達減少27％，JNK蛋白表達減少19％。 [結(jié)論] MitoKATP通道特異性開放劑二氮嗪預(yù)處理可減少大鼠海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧后細胞凋亡，增加大鼠海馬神經(jīng)元對缺氧復(fù)氧損傷的耐受性。JNK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑參與神經(jīng)元凋