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1、目的:觀察沙利度胺(TLD)和三氧化二砷(As2O3)對(duì)急性髓系白血病(AML)細(xì)胞分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和表達(dá)P-糖蛋白(P—gP)的影響。 方法:收集AML患者和健康體檢者的血液,肝素抗凝并離心后,吸取上層血漿置-20℃冰箱內(nèi)冷凍保存。收集AML患者的骨髓液,用Ficoll淋巴細(xì)胞分離液分離出骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMMNC)。37℃、5%CO2、飽和濕度條件下培養(yǎng)細(xì)胞于RPMI 1640培養(yǎng)液中。HL-60/VCR細(xì)胞
2、株的培養(yǎng)基中加入VCR以維持耐藥性。TLD和AS2O3以不同濃度加入培養(yǎng)體系中,同時(shí)設(shè)空白對(duì)照。用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)法檢測(cè)血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中VEGF的濃度,用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞膜上MDR1/p-gp的表達(dá)率。 結(jié)果:(1)AML 患者血漿中 VEGF 濃度明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)。(2)加入TLD和AS2O3后,AML細(xì)胞和HL-60NCR細(xì)胞株培養(yǎng)上清中VEGF濃度明顯降低。(3)加入T
3、LD和AS2O3前后,AML細(xì)胞和HL-60NCR細(xì)胞株的細(xì)胞膜上P—gP的表達(dá)率未見(jiàn)明顯改變。(4)加入TLD和AS2O3前后,AML細(xì)胞培養(yǎng)上清中VEGF的升高和細(xì)胞膜表面PgP的表達(dá)具有一定的正相關(guān)性。 結(jié)論:(1)白血病細(xì)胞可以通過(guò)自分泌途徑分泌VEGF。(2)TLD和As2O3均可抑制HL-60/VCR和 AML細(xì)胞分泌VEGF。(3)TLD和AS2O3均未能影響HL-60/VCR 和 AML 細(xì)胞膜上P—gP的表達(dá)。
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