骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在創(chuàng)面愈合中作用的初步研究.pdf

1、目的：探討骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞在創(chuàng)面愈合中的作用，為研究創(chuàng)傷愈合的機(jī)制和治療方法提供新的思路。 方法：從SD大鼠骨髓中分離、培養(yǎng)、鑒定骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；應(yīng)用5-溴脫氧尿嘧啶(5-BrdU)進(jìn)行體外標(biāo)記。采用析因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)，探討B(tài)rdU最佳標(biāo)記時(shí)間和濃度。制作大鼠全層皮膚缺損模型，將5-BrdU標(biāo)記的MSCs(2×10<'7>)經(jīng)尾靜脈注入模型動物體內(nèi)，以大鼠自體正常皮膚作為對照，在創(chuàng)傷后3、7、14、21、28天等不同時(shí)間點(diǎn)，分

2、別采用大體觀察，免疫組織化學(xué)，免疫熒光化學(xué)染色等檢測手段，觀察MSCs參與創(chuàng)面愈合情況。 結(jié)果：流式細(xì)胞儀鑒定結(jié)果顯示：體外培養(yǎng)P3至P5代的大鼠MSCs細(xì)胞表面抗原CD29、CD90表達(dá)陽性，CD45表達(dá)呈陰性。選用5-BrdU作為MSCs示蹤標(biāo)記，終濃度為10μmol/L，標(biāo)記48h即可滿足移植細(xì)胞的標(biāo)記需要，連續(xù)傳代5次后仍可見BrdU免疫染色陽性。經(jīng)5-BrdU體外標(biāo)記的MSCs進(jìn)行細(xì)胞移植，在大鼠創(chuàng)傷后1、2、3、4周