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文檔簡介
1、蛋白磷酸酶2A(PP2A)是一種絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶。它能控制細胞內(nèi)許多蛋白的磷酸化,從而調(diào)控細胞的生命活動。如:蛋白質(zhì)合成,細胞信號傳導(dǎo),細胞周期,細胞凋亡,代謝和應(yīng)激反應(yīng),由蛋白激酶引發(fā)的信號通路的調(diào)節(jié)。現(xiàn)在對PP2A的復(fù)雜性和它的功能的了解進展迅速。最近的研究主要在于PP2A與人類疾病相關(guān)變化,尤其是癌癥。PP2A是由3個亞基構(gòu)成:催化亞基,結(jié)構(gòu)亞基和調(diào)節(jié)亞基。亞基的交替與許多人類惡性腫瘤有關(guān),PP2A抑制劑或直接激活PP2A藥物
2、為癌癥治療帶來了曙光。目前關(guān)于PP2A-Aα基因是如何調(diào)控的研究已經(jīng)有了一些進展,本實驗分別構(gòu)建了過表達轉(zhuǎn)錄因子ETS-1與AP-2α的表達載體并分別轉(zhuǎn)入了LNCaP細胞,沉默了DU145細胞中的轉(zhuǎn)錄因子ETS-1與AP-2α。并利用Western blot技術(shù)與凝膠遷移滯后實驗初步證明這些轉(zhuǎn)錄因子與PP2A-Aα表達水平的關(guān)系。通過實驗我們得出了這些結(jié)論:
(1)轉(zhuǎn)錄因子Ets-1、AP-2α在DU145和LNCaP細胞系中
3、都有表達;
(2)在DU145和LNCaP細胞系中,轉(zhuǎn)錄因子ETS-1不影響PP2A-Aα基因的表達;
(3)凝膠遷移滯后實驗證明,轉(zhuǎn)錄因子AP-2α在體外能與PP2A-Aα基因啟動子序列特異性的結(jié)合;
(4)對于LNCaP細胞,過表達AP-2α能使PP2A-Aα的表達量減少,對于DU145細胞,沉默AP-2α能使PP2A-Aα的表達量增多,這證明AP-2α能夠負向調(diào)節(jié)PP2A-Aα基因的表達;
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