補(bǔ)腎、活血、化痰三法的不同配伍方藥對(duì)小鼠腦缺血再灌注擬血管性癡呆防治作用的比較研究.pdf

1、目的：血管性癡呆(VD)是因腦血管疾病所致的智能及認(rèn)知功能障礙臨床綜合征。臨床表現(xiàn)以伴發(fā)腦血管病而發(fā)生癡呆為特征。中醫(yī)藥治療VD具有豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，在延緩病情進(jìn)展、改善病人全身癥狀，一定程度上改善智能狀態(tài)等方面表現(xiàn)出優(yōu)勢(shì)，但關(guān)于中醫(yī)藥作用機(jī)制的研究還比較薄弱，致使中醫(yī)藥防治VD的客觀性、科學(xué)性不強(qiáng)。沒有人系統(tǒng)比較不同治法組合配伍后的防治效果和作用機(jī)制。在前期工作中已經(jīng)證實(shí)了臨床上常用的補(bǔ)腎、化痰、活血三法確有保護(hù)腦組織、改善記憶能力的作

2、用。本實(shí)驗(yàn)的目的是從整體、組織和分子水平對(duì)不同治法配伍后的防治作用進(jìn)行比較及闡明其作用機(jī)制，進(jìn)而揭示VD的病因病機(jī)。這將為中醫(yī)臨床制定合理的治則治法奠定基礎(chǔ)，為提高臨床療效提供科學(xué)依據(jù)。 方法：將120只♂KM小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為7組，即假手術(shù)組、模型組、喜得鎮(zhèn)組、補(bǔ)腎化痰藥組、補(bǔ)腎活血藥組、活血化痰藥組、補(bǔ)腎活血化痰藥組。補(bǔ)腎化痰藥、補(bǔ)腎活血藥和活血化痰藥用量均為32g/kg，濃度為(含生藥)3.2g/mL；補(bǔ)腎活血

3、化痰藥用量為40g/kg，濃度為(含生藥)4.0g/mL；喜得鎮(zhèn)用量為0.77mg/kg，用時(shí)用生理鹽水配制成濃度為0.077mg/mL的藥液。各組均術(shù)前10d開始灌胃，灌胃量為1mL/100g，假手術(shù)組和模型組灌服等量生理鹽水，每天1次。手術(shù)當(dāng)天提前2h灌胃，直至術(shù)后15d。造模時(shí)將小鼠用水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，消毒，頸正中切口，體視顯微鏡下分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈，套4號(hào)絲線扣備用。拉緊絲扣，阻斷血流20min，同時(shí)在距尾尖1

4、cm處剪斷放血約0.3mL，熱凝止血。松開絲扣灌注10min后，再次阻斷血流20min，第2次再灌后觀察30min，縫合皮膚。術(shù)后每日肌注青霉素0.2萬U，連續(xù)3d。其中假手術(shù)組只分離頸總動(dòng)脈，套絲扣，但不阻斷血流，尾部不放血，觀察時(shí)間等與其它組相同。術(shù)后第14、15進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，第16天將小鼠分批斷頭，冰盤上快速剖取全腦，棄去嗅球及小腦。每組隨機(jī)取3個(gè)全腦用10％甲醛溶液固定，留作組織切片進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察；其余大腦用冰生理鹽水沖洗

5、血液，再用濾紙拭干，電子天平稱重后加入9倍冷生理鹽水，在玻璃勻漿器中研磨成10％勻漿，4℃、3600r/min離心5min，提取上清液，-20℃凍存待檢。檢測(cè)指標(biāo)為超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、乙酰膽堿酯酶(AchE)、谷氨酸(Glu)。嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。 結(jié)論： 1.實(shí)驗(yàn)證實(shí)臨床上常用的活血、補(bǔ)腎、化痰三法不同配伍的中藥復(fù)方確實(shí)均能提高VD小鼠的學(xué)習(xí)記憶成

6、績(jī)、改善相關(guān)的生化指標(biāo)，具有保護(hù)腦組織、防治小鼠VD的作用。 2.補(bǔ)腎活血化痰法防治小鼠VD的療效優(yōu)于其他治法。 3.活血、補(bǔ)腎、化痰三法不同配伍的中藥復(fù)方防治小鼠VD的作用機(jī)制可能為：通過升高小鼠腦組織中SOD、AchE含量，降低MDA、NOS、NO、Glu含量來起到防治VD的作用。 4.腎虛、血瘀、痰濁為VD最基本的病因病機(jī)，而補(bǔ)腎活血化痰法為防治VD最基本的方法。 5.臨床上治療VD病人應(yīng)遵循辨證論