肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡在膿毒癥大鼠急性肺損傷發(fā)生機(jī)制中的作用的研究.pdf

1、本文旨在揭示腹腔感染時(shí)的急性肺損傷（ALI）主要發(fā)病機(jī)制和致病環(huán)節(jié)，探討地塞米松及中藥復(fù)方清下湯治療對(duì)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡、Fas/FasL相關(guān)基因調(diào)控系統(tǒng)和促炎細(xì)胞因子表達(dá)水平的影響，為揭示細(xì)胞凋亡和炎性細(xì)胞因子介導(dǎo)肺損傷機(jī)制及地塞米松、復(fù)方清下湯的保護(hù)機(jī)制提供相關(guān)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論指導(dǎo)。 方法：(1)復(fù)制動(dòng)物模型：將40只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組：對(duì)照組、模型組、地塞米松組和復(fù)方清下湯組。采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(cecalli

2、gationandpuncture，CLP)，建立腹腔感染模型。在制成腹腔感染模型后立即及12小時(shí)后分別給予相應(yīng)藥物治療；對(duì)照組不行盲腸結(jié)扎及穿孔。(2)在造模后24小時(shí)通過(guò)分離培養(yǎng)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞，用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡及反轉(zhuǎn)錄法檢測(cè)凋亡基因Fas/FasL轉(zhuǎn)錄水平，并且行肺組織病理學(xué)檢查，血清細(xì)胞因子測(cè)定，血?dú)夥治?、肺濕干比值的測(cè)定。 結(jié)果：肺組織切片后HE染色結(jié)果示SO組肺組織形態(tài)基本正常，模型組符合ALI改變；急性肺損

3、傷時(shí)，PaO2和SaO2顯著降低(P＜0.01)，動(dòng)脈血?dú)獗憩F(xiàn)為呼吸衰竭；模型組大鼠肺濕/干比值明顯升高(P＜0.01)；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示模型組肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡明顯增加(P＜0.01)；RT-PCR結(jié)果顯示模型組肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡基因的轉(zhuǎn)錄水平明顯升高(P＜0.01)。血清炎癥因子TNF-α濃度顯示模型組明顯升高(P＜0.01)。經(jīng)藥物治療后，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡、凋亡基因的轉(zhuǎn)錄水平、血清炎癥因子濃度都較模型組不同程度的降低。

4、 結(jié)論：1.肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的凋亡參與急性肺損傷(ALI)的過(guò)程。 2.ALI時(shí)，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的凋亡基因Fas、FasL、Caspsase-3mRNA的表達(dá)均增加。 3.ALI時(shí)血清中炎性細(xì)胞因子TNF-α的含量明顯增加。 4.應(yīng)用地塞米松治療，可以明顯減輕肺組織損傷程度，降低血清中TNF-α的含量、減少肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的凋亡及Fas、FasL、Caspsase-3mRNA的表達(dá)。 5.應(yīng)用復(fù)方