MMP9單核苷酸多態(tài)性與鼻咽癌遺傳易感性及MMP11表達(dá)與鼻咽癌臨床病理變化的關(guān)系研究.pdf

1、目的:通過(guò)病例-對(duì)照研究MMP9基因單核苷酸多態(tài)性(SingleNucleotidePolymorphisms，SNP)與廣東人鼻咽癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)及臨床病理分期的關(guān)系；研究鼻咽癌組織中MMP11mRNA和蛋白的表達(dá)與鼻咽癌臨床病理變化和患者預(yù)后的關(guān)系。 材料與方法:提取433例鼻咽癌病例組與437例正常對(duì)照組人群外周血白細(xì)胞DNA，用PCR-酶切限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)(RestrictionFragmentLengthPolymorph

2、ism，RFLP)法分析C-1562T和第六外顯子R279QSNPs在病例與對(duì)照組中的分布頻率，并用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件分析MMP9基因SNP及其與吸煙交互作用與鼻咽癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系，及與病例組臨床病理分期的關(guān)系。應(yīng)用免疫組化和原位雜交方法檢測(cè)75例鼻咽癌組織中MMP11mRNA和蛋白的表達(dá)，并分析其與各臨床病理變化之間的關(guān)系。 結(jié)果:1.MMP9多態(tài)性與鼻咽癌遺傳易感性的關(guān)系病例組吸煙人群比例(66.74％)明顯高于對(duì)照組

3、(33.19％)(x2=40.08，P＜0.001)，說(shuō)明吸煙可明顯增加這一人群患病風(fēng)險(xiǎn)，經(jīng)性別和年齡校正后的OR值為4.01(95％CI=2.86-5.63)。 MMP9C-1562T多態(tài)產(chǎn)生CC、CT、TT三種基因型，CC基因型和CT+TT基因型在433例病例組分布頻率分別為78.52％和21.48％，在437例對(duì)照組分布頻率分別為78.72％和21.28％，兩組比較無(wú)顯著差異(x2=0.005，P=0.944)，未能增加鼻

4、咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(-1562CT/TT基因型vs.CC基因型，OR=0.91，95％CI=0.38-2.16)。 MMP9第六外顯子R279Q多態(tài)產(chǎn)生RR、RQ、QQ三種基因型，RR基因型和RQ+QQ基因型在378例病例組分布頻率分別為57.94％和42.06％，在333例對(duì)照組分別為57.06％和42.94％，兩組比較無(wú)顯著差異(x2=0.056，P=0.813)，未能增加鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(279RQ/QQ基因型vs.RR基因型

5、OR=0.95，95％CI=0.50-1.79)。 MMP9C-1562T多態(tài)與R279Q多態(tài)聯(lián)合分析與鼻咽癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)，兩組基因型單獨(dú)或聯(lián)合與吸煙增加鼻咽癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)均無(wú)交互作用。鼻咽癌病例組中，-1562CT/TT和RQ/QQ基因型未表現(xiàn)出更高的T分期(經(jīng)年齡、性別和吸煙校正后的OR值分別為1.23和0.84，P＞0.05)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移潛能(經(jīng)年齡、性別和吸煙校正后的OR值分別為0.88和0.68，P＞0.05)，提示MMP

6、9C-1562T多態(tài)與R279Q多態(tài)與鼻咽癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)性。 2.鼻咽癌組織MMP11mRNA及其蛋白表達(dá)與臨床病理變化的關(guān)系鼻咽癌組織MMP11mRNA和蛋白陽(yáng)性顆粒均位于腫瘤細(xì)胞胞漿及癌巢旁的間質(zhì)纖維細(xì)胞胞漿。MMP11mRNA陽(yáng)性表達(dá)率為100％，在癌細(xì)胞與纖維細(xì)胞中陽(yáng)性表達(dá)率分別為97.33％(73/75)和93.33％(70/75)；MMP11蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為98.67％，在所有病例中癌細(xì)胞與纖維細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)率分別

7、為96％(72/75)和93.33％(70/75)。MMP11mRNA和蛋白表達(dá)強(qiáng)度均與腫瘤大小和臨床分期顯著相關(guān)。 MMP11mRNA癌細(xì)胞強(qiáng)陽(yáng)性組和弱陽(yáng)性或陰性組3年無(wú)瘤生存率分別為81.66％和15.09％，MMP11mRNA癌細(xì)胞強(qiáng)陽(yáng)性組的無(wú)瘤生存率顯著低于非強(qiáng)陽(yáng)性組(Logrank分析，P=0.000)；MMP11mRNA纖維細(xì)胞表達(dá)“+”，“++”和“+++”陽(yáng)性組患者的3年無(wú)瘤生存率分別為88.57％、43.89％

8、、14.03％，各組間有顯著性差異(P=0.007)，上述差異以晚期鼻咽癌病人更明顯。 癌細(xì)胞MMP11蛋白表達(dá)“+”，“++”和“+++”陽(yáng)性患者的3年無(wú)瘤生存率分別為83.33％、65.55％、6.56％，各組間有顯著性差異(P=0.000)；纖維細(xì)胞表達(dá)“+”，“++”和“+++”陽(yáng)性患者的3年無(wú)瘤生存率分別為75.80％、51.82％、5.75％，各組間有顯著性差異(P=0.000)；進(jìn)一步分析顯示MMP11癌細(xì)胞和纖維

9、細(xì)胞表達(dá)“+++”陽(yáng)性患者的3年無(wú)瘤生存率顯著低于“+”，“++”陽(yáng)性患者(P值均小于0.05)。提示鼻咽癌組織中MMP11無(wú)論癌細(xì)胞還是癌旁間質(zhì)纖維細(xì)胞蛋白表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性均是預(yù)后不良的標(biāo)志。 鼻咽癌組織中MMP11無(wú)論癌細(xì)胞還是纖維細(xì)胞mRNA與蛋白表達(dá)呈顯著正相關(guān)(P=0.000)。多因素Cox風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析提示鼻咽癌癌細(xì)胞MMP11mRNA/蛋白表達(dá)水平及臨床分期是鼻咽癌獨(dú)立的預(yù)后影響因素。 結(jié)論:1.MMP9基因啟