靜脈移植治療動脈缺損的系列研究.pdf

1、血管損傷不論在和平時(shí)期還是戰(zhàn)爭時(shí)期發(fā)生率都較高，近年來隨著外科技術(shù)的成熟及相關(guān)學(xué)科發(fā)展使血管損傷的治療有了很大的進(jìn)步，血管修復(fù)已成為血管損傷治療的常規(guī)方法。 血管損傷的修復(fù)包括斷端直接吻合、局部修復(fù)和血管替代物移植。對于嚴(yán)重的血管挫傷往往存在大范圍的血管內(nèi)膜損傷，斷端直接吻合極易形成血栓導(dǎo)致修復(fù)失敗，因此需要切除損傷的血管，造成的血管缺失將選擇血管替代物修復(fù)，目前較常用的是自體血管、人工血管替代物等。人工血管替代物由于彈性、順應(yīng)

2、性與動脈差異大，沒有完整的內(nèi)膜，管徑太小(<6mm)易形成血栓，因此常用于大血管的修復(fù)，自體靜脈因其結(jié)構(gòu)與動脈相似就有完整的內(nèi)膜和平滑肌層，因此是中小血管理想的替代物，但由于移植時(shí)機(jī)械、缺血等損傷以及在動脈環(huán)境下血流動力學(xué)的改變，移植的靜脈將隨移植時(shí)間的延長經(jīng)歷一個(gè)動脈化的過程，表現(xiàn)為內(nèi)、中膜過度增厚，管壁僵硬，最終導(dǎo)致移植靜脈管腔再次狹窄。如何減輕移植靜脈內(nèi)膜的過度增厚是防治移植靜脈再狹窄的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)將通過應(yīng)用藥物、外支架等手段對移

3、植靜脈進(jìn)行干預(yù)探討防治移植靜脈內(nèi)膜過度增厚的方法。 第一部分雙層靜脈移植對移植靜脈內(nèi)膜過度增厚的抑制作用 目的：探討自體雙層靜脈移植治療動脈缺損對移植靜脈內(nèi)膜過度增厚的影響。 方法：選取7-8個(gè)月月齡，體質(zhì)量20-25kg，體格健壯的同品系山羊24只，48條股動脈。每只動物左、右股動脈按照完全隨機(jī)的方法分為實(shí)驗(yàn)組和對照組。實(shí)驗(yàn)組將雙層靜脈移植于動脈缺損處，對照組移植單層靜脈，術(shù)后1天、1周、2周和4周多普勒彩色超

4、聲儀測定移植靜脈管腔直徑，術(shù)后1周、2周和4周切取移植靜脈進(jìn)行病理學(xué)和免疫組織化學(xué)檢測，測定各組內(nèi)膜厚度及細(xì)胞增殖及凋亡情況。 結(jié)果：靜脈移植后隨術(shù)后時(shí)間的延長，管徑逐漸增加，實(shí)驗(yàn)組靜脈管徑增加小于對照組；術(shù)后1周、2周和4周對照組內(nèi)膜厚度分別為72.68±12.87、172.62±48.01、284.39±37.72，實(shí)驗(yàn)組內(nèi)膜厚度分別為50.35±8.92、105.38±26.39、201.84±30.21，實(shí)驗(yàn)組內(nèi)膜厚度明

5、顯小于對照組。術(shù)后1周、2周和4周對照組PCNA指數(shù)分別為26.93±2.08、45.78±4.32、29.60±2.59，TUNEL指數(shù)分別為18.93±2.06、27.68±3.34、21.15±1.43，實(shí)驗(yàn)組PCNA指數(shù)分別為19.75±1.71、33.26±3.30、21.54±3.52，TUNEL指數(shù)分別為15.11±1.18、22.56±2.55、17.98±2.04，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖指數(shù)和凋亡指數(shù)分別均小于對照組。

6、 結(jié)論：雙層靜脈移植可以有效的抑制移植靜脈管腔的過度擴(kuò)張，并抑制內(nèi)膜過度增厚。 第二部分阿托伐他汀對移植靜脈內(nèi)膜增厚抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究 目的：探討阿托伐他汀對靜脈移植術(shù)后移植物內(nèi)膜過度增厚的影響。 方法：選取7-8個(gè)月月齡，體質(zhì)量20-25kg，體格健壯的同品系山羊20只。隨機(jī)分為對照組、實(shí)驗(yàn)組，每組10只動物。手術(shù)暴露雙側(cè)股動脈并部分切除造成動脈缺損，選取大隱靜脈一段倒置吻合修復(fù)動脈缺損，實(shí)驗(yàn)組在飼料中以60m

7、g/d的量摻入阿托伐他汀片，術(shù)后2周，4周取材，對移植靜脈進(jìn)行病理學(xué)、免疫組織化學(xué)檢測，測定內(nèi)膜厚度，PCNA指數(shù)和TUNEL指數(shù)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析各組間的差異。 結(jié)果：病理學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)，靜脈移植術(shù)后2周和4周，內(nèi)膜不同程度的增厚，術(shù)后2周和4周對照組內(nèi)膜厚度分別為205.74±20.17 um、331.70±25.18um，實(shí)驗(yàn)組內(nèi)膜厚度分別為168.84±19.34 um 194.51±17.02um，實(shí)驗(yàn)組內(nèi)膜厚度明顯小于對照組(

8、p<0.01)；術(shù)后2周和4周實(shí)驗(yàn)組PCNA指數(shù)分別為27.19±1.96、16.15±2.19，明顯少于對照組的43.04±2.63、28.8±2.24(p<0.01)；術(shù)后2周和4周，實(shí)驗(yàn)組TUNEL指數(shù)為35.78±2.59、3 1.02±2.59，明顯大于對照組的26.07±2.05、20.74±1.86(p<0.01)。 結(jié)論：阿托伐他汀治療可以減輕移植靜脈內(nèi)膜的過度增厚。 第三部分管徑不同的靜脈移植物治療動脈

9、缺損的實(shí)驗(yàn)研究 目的：探討靜脈移植治療動脈缺損時(shí)，管徑的不同對移植物內(nèi)膜增厚的影響。 方法：選取同品系雄性短毛山羊24只(河北醫(yī)科大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)室提供)，體質(zhì)量20-25kg，體格健壯，體型勻稱，7-8個(gè)月月齡大小。隨機(jī)分為A、B、C 3組，每組8只動物16條股動脈，彩色多普勒超聲測得術(shù)區(qū)股動脈直徑為2.47±0.05 mm，靜脈移植術(shù)后第一天測得的移植物管徑作為移植靜脈的初始管徑。移植術(shù)后A組靜脈的初始直徑

10、是宿主動脈的68.42％，B組靜脈的初始直徑是宿主動脈的95.95％，C組靜脈的初始直徑是宿主動脈的160.73％。測定術(shù)后2周和4周移植物管徑，計(jì)算血管壁剪切應(yīng)力，取材進(jìn)行病理學(xué)分析，測定內(nèi)膜厚度和PCNA指數(shù)。 結(jié)果：術(shù)后2周和4周，各組移植靜脈內(nèi)膜層明顯增厚，可見大量增殖的細(xì)胞，與中膜層分界明顯，A、B、C組術(shù)后2周內(nèi)膜厚度分別為255.6723.93um、200.14±36.33um、276.39±39.05um，術(shù)后4

11、周內(nèi)膜厚度分別為379.42±26.39 um、315.12±18.69um、394.99±20.19um，B組靜脈移植物內(nèi)膜厚度小于A、C組(p<0.05)，A、C組間內(nèi)膜厚度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。A、B、C組術(shù)后2周PCNA指數(shù)分別為49.63±3.84、40.17±6.25，51.17±4.38，術(shù)后4周PCNA指數(shù)分別為36.96±6.42、27.23±2.21、34.89±3.04，B組靜脈移植物內(nèi)膜PCNA指數(shù)小于A

12、，C組。 結(jié)論：應(yīng)用靜脈移植修復(fù)動脈缺損，移植靜脈管徑與動脈管徑相近時(shí)，靜脈內(nèi)膜增厚程度最小。 第四部分山羊全身麻醉方法的相關(guān)研究 動物實(shí)驗(yàn)是外科學(xué)科研工作中一種重要而有效的研究方法，實(shí)驗(yàn)動物的選擇、實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕⒂葹橹匾?，血管外科科學(xué)研究中常用的實(shí)驗(yàn)動物有兔、犬、豬和山羊等，兔血管較細(xì)、靜脈壁菲薄，與人類的血管壁差異較大，且手術(shù)操作困難，通暢率低，一些實(shí)驗(yàn)設(shè)想不能順利實(shí)現(xiàn)，因此犬、豬和山羊等大型動物成了血管外科

13、實(shí)驗(yàn)合適的選擇。山羊溫順、體形大、肢體修長、四肢血管分布表淺易于解剖操作，動靜脈管徑及壁厚與人類小血管相似，是血管外科科學(xué)研究中較為理想的實(shí)驗(yàn)動物。為了便于實(shí)驗(yàn)過程中的操作、保證血管吻合的質(zhì)量和減輕動物的痛苦，滿意的麻醉非常重要。實(shí)驗(yàn)動物麻醉要求便捷、高效、且死亡率低。山羊?qū)儆诜雌c動物，不適當(dāng)?shù)穆樽砣菀壮霈F(xiàn)胃內(nèi)容物返流勿吸，致使明顯的呼吸不暢、呼吸困難甚至死亡?，F(xiàn)在常用的巴比妥鹽類麻醉藥，如戊巴比妥鈉有較明顯的呼吸抑制作用，且作用時(shí)間短

14、，為了達(dá)到滿意的麻醉效果，術(shù)中往往需要反復(fù)追加，用量稍大及可引起動物死亡。目前常用的麻醉方法其缺點(diǎn)是：對于大型動物，如要長時(shí)間麻醉需行氣管插管，通過靜脈連續(xù)注入藥，這些操作較為繁瑣、困難，耗時(shí)費(fèi)力，不適于大量動物實(shí)驗(yàn)操作，本實(shí)驗(yàn)將通過動物實(shí)驗(yàn)的方法尋求了一種操作簡單、麻醉效果好且安全的復(fù)合麻醉方法。 目的：對比山羊單純麻醉與復(fù)合麻醉的效果，探討一種安全高效便捷的山羊麻醉方法。 方法：選取山羊30只，隨機(jī)分為A、B、C三組

15、，仰臥位固定，頭偏向一側(cè)，均不行氣管插管術(shù)，通過肌注的方式給藥，并通過逐漸追加藥物來延長麻醉時(shí)間，A組給予單純戊巴比妥鈉麻醉，B組給予單純氯胺酮麻醉，C組給予地西泮、戊巴比妥鈉和氯胺酮復(fù)合麻醉，記錄三種麻醉方法的起效時(shí)間、麻醉維持時(shí)間、麻醉藥物用量及麻醉死亡率。 結(jié)果：A組動物第一次給藥后18.1±2.6min進(jìn)入有效麻醉狀態(tài)，有效麻醉維持93±9.6min，如要延續(xù)麻醉時(shí)間需繼續(xù)注射戊巴比妥鈉，維持有效麻醉狀態(tài)192.1±10

16、.3 min，需藥物1236.6±69.2 mg，死亡率33.3％；B組：第一次給藥后10.4±1.5 min動物進(jìn)入有效麻醉狀態(tài)，維持29.5±3.9 min，如要延續(xù)麻醉時(shí)間需繼續(xù)注射氯胺酮，維持有效麻醉狀態(tài)80.9±6.9 min，需藥物458.6±21.3 mg；C組第一次注射戊巴比妥鈉和氯胺酮后5.6±1.4 min動物進(jìn)入有效麻醉狀態(tài)，如要延續(xù)麻醉時(shí)間需繼續(xù)注射兩種藥物，維持有效麻醉狀態(tài)239±13.3 min，需戊巴比妥鈉