七氟醚麻醉對發(fā)育期神經系統(tǒng)損害的行為學觀察和甲基化調控研究.pdf

1、目的：許多研究表明哺乳動物在發(fā)育關鍵期接受全身麻醉藥作用，會對發(fā)育期神經系統(tǒng)和成年后認知能力產生不良影響，但對其作用機制尚無定論。表觀遺傳學甲基化調控在神經系統(tǒng)發(fā)育，學習記憶等過程中均有重要作用。七氟醚是目前臨床小兒麻醉最常用的全麻藥之一，本文通過觀察出生后8天SD大鼠接受七氟醚麻醉后，成年期學習記憶能力改變和在不同時間點的杏仁核，海馬，皮層等各腦區(qū)DNA甲基轉移酶的變化，探索七氟醚麻醉對發(fā)育期神經系統(tǒng)可能的表觀遺傳學調節(jié)機制。

2、　　 方法：取出生后8天SD大鼠幼仔，雌雄隨機，體重約20g左右，給予3％七氟醚復合70％氧氣麻醉4h；對照組在相同環(huán)境下暴露于空氣4h后返回原飼養(yǎng)籠中。行為學實驗只選擇兩組中雄性成年大鼠，于出生后8周進行開場實驗，高架十字迷宮實驗，Morris水迷宮實驗，場景性恐懼記憶實驗檢測其學習記憶能力，每項實驗用鼠每組8-14只。分子實驗部分雌雄大鼠隨機，分別于麻醉結束后即刻，麻醉結束后2h，24h，1天，7天，28天，56天各時間點分離杏仁

3、核，海馬，皮層各腦組織，進行實時熒光定量PCR反應分析DNMT1，DNMT3a, NR1, NR2B, BDNF, Reelin各基因的mRNA表達水平，每組用鼠4-7只。另取兩組各7只大鼠，于麻醉結束后和暴露空氣結束后于開胸直視下左心室取動脈血進行血氣分析檢測七氟醚麻醉對動物血氧，血糖水平的影響。
　　 結果：新生期接受七氟醚麻醉大鼠，成年后主要表現(xiàn)為海馬依賴的空間類型整合能力和場景性恐懼記憶受損。DNA甲基轉移酶（DNMT）

4、變化也主要集中在海馬，表現(xiàn)為DNMT1在麻醉結束即刻顯著性降低，后恢復至與對照組相近水平；DNMT3a在麻醉后2h內呈先升高后降低的雙向變化。NR2B基因表達水平在麻醉后24h顯著性升高；BDNF基因表達水平麻醉后2h，24h均顯著性降低。血氣分析結果顯示，4h七氟醚麻醉對大鼠血氧含量，通氣狀況和血糖水平沒有顯著性影響。
　　 結論：實驗結果表明，新生大鼠接受七氟醚麻醉，可主要對成年后海馬依賴的空間整合，恐懼記憶能力造成損傷，而