CD82抑制卵巢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲作用的研究.pdf

1、目的:
　　 目前卵巢癌仍是嚴(yán)重威脅廣大婦女健康的惡性腫瘤,盡管手術(shù)及放化療對其治療有效率大大提高,但其5年存活率仍只有30%左右。侵襲和轉(zhuǎn)移是引起卵巢癌患者死亡的主要原因。故深入探究卵巢癌侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)的細(xì)胞因子及其作用對進(jìn)一步阻遏卵巢癌的侵襲和轉(zhuǎn)移具有重要意義。CD82基因又稱Kail基因,是四次跨膜超家族(TM4SF)成員之一.研究表明,表達(dá)CD82基因的癌細(xì)胞其轉(zhuǎn)移能力受抑制,但其原發(fā)瘤的生成并不受到影響。CD82基因可

2、能是直接作用于腫瘤轉(zhuǎn)移抑制的基因。本文擬驗證CD82對卵巢癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移具有抑制作用,為防止卵巢癌轉(zhuǎn)移提供新的治療靶點(diǎn)。
　　 方法:
　　 應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建CD82質(zhì)粒;預(yù)實驗確定中等轉(zhuǎn)移能力的卵巢癌細(xì)胞株(SKOV3)的G418最佳篩選濃度;轉(zhuǎn)染CD82質(zhì)粒至卵巢癌細(xì)胞株(SKOV3),同時轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒至卵巢癌細(xì)胞株(SKOV3)及未轉(zhuǎn)染卵巢癌細(xì)胞株(SKOV3)做為對照組;G418最佳濃度篩選并建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

3、并過度表達(dá)CD82mRNA的卵巢癌細(xì)胞株(SKOV3-CD82);通過體外細(xì)胞粘附實驗、劃痕修復(fù)實驗及侵襲實驗與轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的卵巢癌細(xì)胞株(SKOV3-vector)及未轉(zhuǎn)染的卵巢癌細(xì)胞株(SKOV3)對比,分析CD82對卵巢癌細(xì)胞遷移及侵襲等生物學(xué)行為的影響。
　　 結(jié)果:
　　 1、確定G418對卵巢癌細(xì)胞株(SKOV3)的最佳篩選濃度為400μg/ml。
　　 2、RT-PCR法證實轉(zhuǎn)染目的基因CD82的卵巢