粘著斑激酶(FAK)對肝癌細胞增殖及TNF-α誘導(dǎo)的凋亡的影響.pdf

1、上海醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文粘著斑激酶(FAK)對肝癌細胞增殖及TNF-α誘導(dǎo)的凋亡的影響姓名：方Y(jié)i申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)指導(dǎo)教師：查錫良20000501B 1 0 t 鑒定，獲得一株F A K 含量被抑制了一半的轉(zhuǎn)染株細胞A S - 7 7 2 1 。同時以p c D N A 3 空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染S M M C - 7 7 2 1 作為對照。接著，我們研究了抑制F A K 表達對S M M C - 7 7 2 1 細胞增殖的影響。與

2、對照p c - 7 7 2 1 相比，h S - 7 7 2 1 細胞的生長速率和軟瓊脂培養(yǎng)克隆形成能力都被明顯抑制。一另外流式細胞儀分析細胞周期揭示，A s 一7 7 2 1細胞的s 期細胞減少了1 5 ％。這些說明在S M M C - 7 7 2 1 細胞中降低F A K含量能抑制細胞增殖，從而改善腫瘤細胞的惡性生物學(xué)行為。降低F A K 含量也降低了細胞對胞外基質(zhì)的粘附能力。在1 ．2 5 9 9 ／m l 纖連蛋白時，A S -

3、 7 7 2 1 的粘附能力僅為對照的1 ／3 。同時，降低F A K 含量并未影響整合蛋白o ‘，p ，的蛋白水平，提示是F A K 低含量引起細胞粘附能力降低。以上結(jié)果表明用F A K 反義質(zhì)粒降低S M M C 一7 7 2 1 細胞的F A K 含量后可以抑制S M M C 一7 7 2 1 細胞的增殖，粘附能力。第二部分F A K 調(diào)節(jié)T N F - 伐和環(huán)己亞胺協(xié)同誘導(dǎo)細胞凋亡的機制的研究 。文獻報道F A K 參與調(diào)節(jié)多種

4、因素誘導(dǎo)的凋亡。如過表達持續(xù)激活的F A K 能保護M D C K 細胞免于失巢凋亡，抑制原癌基因c - m y c 誘導(dǎo)的凋亡。而目前對于F A K 在T N F - c t 誘導(dǎo)的凋亡中的作用并無報道。T N F —a 是一個具有多種功能的細胞因子。根據(jù)不同的細胞類型，T N F 一0 【可以產(chǎn)生諸如增殖，炎癥，凋亡的多種生物效應(yīng)。一些細胞對T N F - ( x 毒性敏感，而有些細胞則能拮抗T N F - c t 誘導(dǎo)的凋亡，而必

5、須用環(huán)己亞胺協(xié)同誘導(dǎo)。目前對于這部分細胞為什麼能拮抗T N F - c t 毒性的原因并不明確，而只有三種假設(shè)：1 ) T N F 一儀本身激活了某些抗凋亡信號，2 ) T N F 一Ⅸ刺激合成某些生存因子保護細胞免于凋亡，3 )T N F - ( x 誘導(dǎo)的凋亡信號尚不足以啟動凋亡過程。最近的文獻報道T N F 一僅能夠激活P I 3 K - P K B ( A k t ) 信號通路從而拮抗其本身誘導(dǎo)的凋亡作用。P K B 是一絲／蘇