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文檔簡介
1、目的:研究KiSS-1基因在人絨毛膜癌細胞株BeWo上的表達以及17-β雌二醇(17-βE2)、甲羥孕酮(MPA)對人絨毛膜癌細胞株BeWo上KiSS-1基因表達的調控,從而探討KiSS-1基因在胚胎種植和發(fā)育過程中的作用。 方法:在體外常規(guī)條件下培養(yǎng)BeWo細胞株,在不同濃度的17-β雌二醇(17-βE2)、甲羥孕酮(MPA)的作用下,用RT-PCR、Westernblot兩種方法定量檢測該細胞株上KiSS-1基因mRNA和蛋
2、白的表達。 結果: 1.在人絨毛膜癌細胞株BeWo上存在KiSS-1mRNA和蛋白的表達。 2.不同濃度的雌激素對KiSS-1基因表達的調控呈現出不同的特點。在較低濃度的雌激素(10-9mmol/l,10-8mmol/l)的作用下,KiSS-1mRNA和蛋白的表達顯著增高(p<0.05),在較高濃度的雌激素(10-7mmol/l)的作用下,KiSS-1mRNA和蛋白的表達則顯著降低(p<0.05)。 3.
3、在不同濃度的孕激素(10-7mmol/l,10-6mmol/l,10-5mmol/l)的作用下,KiSS-1mRNA和蛋白的表達均顯著增高(p<0.05),但隨著孕激素濃度的增高,KiSS-1mRNA和蛋白的表達是逐漸下降的(除10-7mmol/l和10-6mmol/l組間無差異外,其余各組間均為p<0.05)。 結論: 1.KiSS-1基因是一種轉移抑制基因,它存在于人絨毛膜癌細胞株BeWo上,說明該基因參與滋養(yǎng)細胞侵
4、襲能力的調控。 2.不同濃度的雌,孕激素均對BeWo細胞上的KiSS-1mRNA和蛋白的表達有調控作用。 3.生理濃度(10-9mmol/l)和10倍于生理濃度的雌激素均上調KiSS-1基因的表達,表明在類似妊娠早、中期雌激素濃度時,通過增加該基因的表達而抑制滋養(yǎng)細胞侵襲;而在高濃度雌激素時,則通過抑制KiSS-1基因而促進滋養(yǎng)細胞侵襲力。 4.生理濃度(10-7mmol/l)至100倍于生理濃度的孕激素均上調K
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