早期食管鱗癌預(yù)后影響因素和死因分析、rs1位點(diǎn)變異與臨床分期關(guān)系.pdf

1、1.研究背景和目的
　　早期食管鱗癌(Tis～T1N0M0)患者病變局限在粘膜和粘膜下層無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，術(shù)后治療效果好，文獻(xiàn)報(bào)道5年生存率在67％～92％。但因早期患者無特異癥狀，多數(shù)患者為普查發(fā)現(xiàn)，而臨床首次診斷率僅2％～4％。同時(shí)臨床上發(fā)現(xiàn)部分早期癌患者術(shù)后很快發(fā)生遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，但缺乏對大樣本早期癌臨床病理特征及遠(yuǎn)期隨訪觀察研究。此外，早期食管癌分子機(jī)制尚不清楚，缺乏早期癌篩查的敏感指標(biāo)和方法。本研究正是基于實(shí)驗(yàn)室1973

2、～2013年所積累的34萬例食管癌資料庫，并結(jié)合已完成的全基因組關(guān)聯(lián)分析技術(shù)（genomewideassociationstudy,GWAS）所發(fā)現(xiàn)的與生存相關(guān)的基因多態(tài)性（singlenucleotidepolymorphisms，SNP）變異位點(diǎn)，闡明早期食管鱗癌5年生存率及腫瘤長度、大體類型、腫瘤浸潤程度等臨床病理預(yù)后主要影響因素，探討早期癌死亡原因，揭示SNP變異與各臨床分期關(guān)系，為早期診斷提供敏感分子指標(biāo)。
　　2.材料

3、與方法
　　2.1研究對象
　　2.1.1早期食管鱗癌患者預(yù)后影響因素、死亡原因分析
　　2387例早期食管鱗癌患者，均在1975～2012年間行手術(shù)治療并經(jīng)病理確診為早期食管鱗癌。其中男性1325例（平均58.84±8.04歲），女性1062例（平均59.33±7.90歲），中位年齡都是59歲，男∶女=1.3∶1。
　　2.1.2rs1位點(diǎn)變異與不同期別食管鱗癌關(guān)系
　　3074例食管鱗癌患者，其中早期2

4、30例，中晚期2844例。男性1863例（平均60.51±9.04歲），女性1211例（平均61.35±9.16歲），男性中位年齡60歲，比女性小1歲。男∶女=1.5∶1。病例均來自實(shí)驗(yàn)室1973～2013年所積累的34萬例食管癌資料庫。
　　2.2問卷調(diào)查、醫(yī)院資料核實(shí)和生存隨訪
　　采用入戶問卷調(diào)查或電話隨訪方式，如實(shí)記錄患者信息，并根據(jù)患者提供的治療醫(yī)院，完成治療信息的補(bǔ)充核對。隨訪時(shí)間從手術(shù)當(dāng)日算起，截止到2014年

5、02月18日。
　　2.3早期食管鱗癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)
　　內(nèi)鏡觀察為淺表粘膜病變，如糜爛、斑塊和粘膜粗糙等表現(xiàn);活檢及術(shù)后病理報(bào)告為食管鱗癌，浸潤程度為原位癌、粘膜內(nèi)、粘膜固有層或粘膜下層，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移同時(shí)無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(即0期:TisN0M0和Ⅰ期:T1N0M0)。
　　2.4血樣采集、DNA提取和Taqman基因分型
　　在患者知情同意情況下，簽署知情同意書，每位患者采集5mlEDTA抗凝外周靜脈血。采用Qiagen

6、FlexiGeneDNA提取試劑盒提取出血細(xì)胞全基因組DNA。應(yīng)用Taqman(@)基因分型分析技術(shù)，檢測rs1位點(diǎn)基因型。
　　2.5統(tǒng)計(jì)分析
　　數(shù)據(jù)采用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用x2檢驗(yàn)分析計(jì)數(shù)資料;壽命表法計(jì)算生存率;Kaplan-Meier法做單因素分析，并用Log-rank檢驗(yàn)分析不同組間的差異;并采用Cox風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素。檢驗(yàn)水準(zhǔn):α=0.05。
　　3.結(jié)果
　　

7、3.1患者術(shù)后生存狀況
　　早期食管鱗癌患者術(shù)后1年、2年、3年、4年、5年、10年、20年生存率分別為:93％、88％、85％、82％、78％、65％、53％（術(shù)后時(shí)間越長，生存率越趨于穩(wěn)定），平均生存期為5.70±4.26年，中位生存期為4.86年。
　　3.2早期食管鱗癌患者臨床病理表型與預(yù)后關(guān)系
　　單因素分析顯示，家族史、病理分期、浸潤程度、分化程度、大體類型、腫瘤長度、腫瘤部位、高低發(fā)區(qū)、學(xué)歷、發(fā)病年齡與早

8、期食管鱗癌預(yù)后顯著相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。性別、職業(yè)、淋巴結(jié)切除數(shù)目、手術(shù)切口上下切緣等與預(yù)后相關(guān)性不顯著，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。將以上10個(gè)有意義的因素引入COX多因素分析，發(fā)病年齡、腫瘤長度、大體類型、腫瘤浸潤程度是影響食管鱗癌患者生存期的獨(dú)立因素（P均＜0.05）。較小年齡相對于大年齡預(yù)后較好(＜50y:HR=0.237，95％CI:0.15-0.38);較小腫瘤長度相對于較大者預(yù)后較好(＜1.5c

9、m:HR=0.649，95％CI:0.49-0.86);與糜爛型相比，斑塊型預(yù)后較好(HR=0.599，95％CI:0.48～0.74);浸潤程度為粘膜層相對于粘膜下層預(yù)后較好(HR=0.529，95％CI:0.42-0.67)。
　　3.3去世患者死亡原因分析
　　526例去世的患者中，腫瘤原因去世418例(79.47％)，非腫瘤原因去世108例(20.53％)。腫瘤原因包括癌細(xì)胞廣泛轉(zhuǎn)移（肺、肝、骨轉(zhuǎn)移等），及腫瘤復(fù)發(fā)。

10、非腫瘤原因包括吻合口瘺、肺部感染、心腦血管疾病等?；颊吣挲g越大因非腫瘤原因去世的比例趨于升高（x2=18.881，P=2.89E-04），且≥70歲的患者因非腫瘤原因去世的比例較高(x2=10.663，P=1.00E-03);工人、干部等非農(nóng)民因非腫瘤原因去世的比例比農(nóng)民高(x2=4.697，P=3.00E-02);去世時(shí)間在3年以內(nèi)的患者，生存期越長，腫瘤原因去世的比例趨于升高(x2=36.408，P=6.07E-06)，且2～3年時(shí)

11、最為明顯(x2=8.294，P=4.00E-03);生存期在10年以上的患者，非腫瘤原因去世的患者比例明顯增加，其中10～20年時(shí)更顯著(x2=12.335，P=4.44E-04)。本研究中60例早期食管鱗癌患者在1年內(nèi)去世，腫瘤、非腫瘤原因死亡的分別是42和18例。因腫瘤原因與非腫瘤原因死亡的患者相比生存期差異明顯，前者生存期長于后者（分別為6.20、3.10月）。通過查找姚村食管癌醫(yī)院2006～08年123例早期食管鱗癌病人的HE切

12、片，發(fā)現(xiàn)3例已去世病人的HE切片中的微小血管中有癌栓存在，提示癌細(xì)胞血道轉(zhuǎn)移可能是腫瘤短時(shí)間內(nèi)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移并導(dǎo)致死亡的原因之一。
　　3.4AAAAA基因rs1位點(diǎn)的基因多態(tài)性與食管鱗癌不同臨床表型關(guān)系
　　rs1基因型分布與性別、年齡、家族史、分化程度、T分期、N分期、腫瘤長度、大體類型均無顯著相關(guān)性，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。rs1基因型分布與各臨床分期比較時(shí)，相關(guān)性顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=9.703，P=0

13、.046)。但三種基因型組間比較時(shí)，各基因型在早、中、晚各期別中的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。
　　4.結(jié)論
　　4.1早期食管鱗癌患者浸潤程度越淺、大體類型為斑塊型、腫瘤長度、發(fā)病年齡越小，其預(yù)后可能越好;
　　4.2早期食管鱗癌患者術(shù)后短時(shí)間內(nèi)死亡，特別是一年內(nèi)因癌細(xì)胞快速廣泛轉(zhuǎn)移去世，提示對其治療方式需要重新評估;
　　4.3rs1位點(diǎn)變異與食管鱗癌早中晚分期相關(guān)性不顯著，需探究對臨床分期和預(yù)后更敏