慢病毒介導(dǎo)RNA干擾抑制CCR3基因表達(dá)對小鼠嗜酸性細(xì)胞增殖及凋亡的影響.pdf

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。^ 2學(xué)位論文作者簽名( 手寫) ：許囊簽字日期：沙侈年二月z 日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論

2、文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國學(xué)術(shù)期刊( 光盤版) 電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫) ) 中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公

3、眾提供信息服務(wù)。( 保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名( 手寫) ：咯菱導(dǎo)師簽名( 手簽字日期：沙f ；年0 月‘日 簽字日期：沙薩A b s t r a c tA B S T R A C TO b j e c t i v e ：T h i s s t u d y w a sp e r f o r m e d t o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t s o f al e

4、n t i v i r a l v e c t o re x p r e s s i n g s h R N A f o r R N A i n t e r f e r e n c eo f m u r i n eC C R 3 g e n eo n t h el e v e lo f m R N Aa n dp r o t e i n i n h i b i t i o na n dt o e v a l u a t e i t s

5、e f f e c t o np r o l i f e r a t i o na n da p o p t o s i so fe o s i n o p h i l s ，l a y i n g a s o l i d f o u n d a t i o nf o rg e n e t h e r a p y o f a l l e r g i cr h i n i t i si nv i v o ．M e t h o d s ：P

6、 r i m a r yc u l t u r e dm o u s eb o n em a r r o w - d e r i v e de o s i n o p h i l sw e r ei n f e c t e dw i t hs h R N A —m C C R 3 i n t e r f e r i n g v i r i o n s f o r 4 8 h ，a n d t h e o p t i m a l d o

7、s e w a s c h o s e na c c o r d i n g t op r e l i m i n a r ye x p e r i m e n t s ．T h ei n t e r f e r e n c ee f f e c t s o nt h el e v e lo fm R N Aa n dp r o t e i n i n h i b i t i o n w e r ei d e n t i f i e d

8、 b y Q P C Ra n dw e s t e m b l o t ，r e s p e c t i v e l y ．A d d i t i o n a l l y , e o s i n o p h i l v i a b i l i t y w a sa s s e s s e d b yM T Sa s s a ya n d a p o p t o s i sw a sd e t e r m i n e d b y T U

9、 N E L m e t h o d ．R e s u l t s ：( 1 ) T h e Q P C Ra n d w e s t e m b l o t r e s u l t s i n d i c a t e t h a t r e c o m b i n a n t s h R N A —e x p r e s s i n g l e n t i v i r a l v e c t o r s p e c i f i c t

10、 o m o u s e C C R 3 g e n e h a s h i g h e f f i c i e n ti n t e r f e r e n c e e f f e c t o nt h e l e v e l o fm R N A a n d p r o t e i ni n h i b i t i o n c o m p a r e dw i t hc o n t r o l g r o u p s ( P <

11、; 0 ．0 5 ) ．( 2 ) C o m p a r e dw i t hc o n t r o l g r o u p s ，i n t e r f e r i n g v i r i o n s i n h i b i tt h e v i a b i l i t yo fe o s i n o p h i l s b y M T Sa s s a y ( P < 0 ．0 5 ) a n d i n d u c e a

12、 p o p t o s i sb y T U N E Lm e t h o d伊< 0 ．0 5 ) ．C o n e l u s i o n ：( 1 ) L e n t i v i r a li n t e r f e r e n c e v e c t o rf o rm o u s eC C R 3 g e n eh a sb e e n c o n s t r u c t e ds u c c e s s f u l

13、l y ．( 2 ) W eh a v e d e m o n s t r a t e d t h a t s h R N A - m C C R 3i n t e r f e r i n g v i r i o n s i n h i b i te o s i n o p h i lg r o w t h a n d i n d u c ea p o p t o s i s ．K e y w o r d s ：E o s i n o