原發(fā)性肝細(xì)胞癌血清蛋白質(zhì)組雙向凝膠電泳—飛行時(shí)間質(zhì)譜分析.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文原發(fā)性肝細(xì)胞癌血清蛋白質(zhì)組雙向凝膠電泳—飛行時(shí)間質(zhì)譜分析姓名：耿鑫申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)（病理學(xué)）指導(dǎo)教師：張維銘20040501天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文摘 要( A b s t r a c t inC h in e s e )目的：運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)雙向凝膠電泳和質(zhì)譜技術(shù)，研究原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者與正常健康個(gè)體血清蛋白質(zhì)組表達(dá)圖譜的差異，尋找和確定原發(fā)性肝細(xì)胞癌特征性血清標(biāo)志物。為肝癌的臨床早期診

2、斷與治療提供可靠的、準(zhǔn)確靈敏的實(shí)驗(yàn)室參考指標(biāo)。方法：原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者與正常人血清標(biāo)本獲得后，雙向凝膠電泳的第一向電泳采用固相p H 梯度電泳，第二向采用S D S 一聚丙烯酰胺凝膠電泳分析血清蛋白質(zhì)組成分。電泳后經(jīng)銀染或考馬斯亮藍(lán)染色，I r n a g c M a s t e r 雙向凝膠電泳軟件分析，將有意義的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)膠內(nèi)胰蛋白酶解，經(jīng)過(guò)基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜( M A L D I - T O F ) 鑒定。本項(xiàng)研究

3、還對(duì)血清白蛋白和k G 的去除、蛋白上樣量、等電聚焦參數(shù)、平衡條件、兩向之間的轉(zhuǎn)移、S D S - 聚丙烯酰胺凝膠的濃度等血清蛋白質(zhì)組雙向凝膠電泳的關(guān)鍵步驟進(jìn)行了改進(jìn)和優(yōu)化。結(jié)果：1 ．對(duì)血清雙向凝膠電泳的關(guān)鍵步驟改進(jìn)和優(yōu)化后獲得了較好的肝細(xì)胞癌患者及正常人血清蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜。2 ．原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者血清與正常健康個(gè)體血清相比較，經(jīng)雙向凝膠電泳軟件分析，共找到3 3 個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，其中6 個(gè)蛋白質(zhì)在原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者血清中含