TSA對人肝癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖及CXCR4表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討組蛋白去乙酰化酶抑制劑，曲古霉素(TSA)對人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721細(xì)胞的增殖，以及對SMMC-7721細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4在mRNA 及蛋白水平的表達(dá)的影響。
　　 方法：1.分別用200，400，600，800nM/L TSA 處理體外培養(yǎng)SMMC-7721細(xì)胞24 小時，通過細(xì)胞增殖實驗cck-8 法測定TSA 相應(yīng)濃度下的細(xì)胞抑制率。2.細(xì)胞免疫組化法觀察TSA 800nM/L 處理后的SMMC-

2、7721細(xì)胞的趨化因子受體CXCR4的表達(dá)。3.普通PCR及Real-Time PCR法檢測細(xì)胞經(jīng)TSA （800nM/L)處理后，CXCR4在mRNA表達(dá)上的變化。4.Western blot 法檢測經(jīng)過TSA（400nM/L,800nM/L)處理后趨化因子受體CXCR4在蛋白水平上的變化。
　　 結(jié)果：組蛋白去乙?；敢种苿㏕SA 具有顯著抑制SMMC-7721細(xì)胞增殖的作用，且隨著作用濃度的升高抑制率逐漸增強(qiáng)（P＜0.05

3、）。腫瘤細(xì)胞經(jīng)TSA 處理后，趨化因子受體CXCR4表達(dá)顯著增強(qiáng)，細(xì)胞免疫組化可見，處理組相較對照組細(xì)胞陽性率增加，胞漿內(nèi)棕色顆粒明顯增多，普通PCR及Real-Time PCR結(jié)果顯示，處理后腫瘤細(xì)胞中CXCR4 mRNA 量較對照組增強(qiáng)2.116倍（P＜0.05）。最后，Western blot 法檢測也表明，TSA 處理組腫瘤細(xì)胞的CXCR4在蛋白水平也顯著上調(diào)。
　　 結(jié)論:組蛋白去乙酰化酶抑制劑TSA在體外對人肝癌細(xì)胞