腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在食管癌的浸潤(rùn)及其對(duì)預(yù)后影響的研究.pdf

1、背景和目的：惡性腫瘤組織有大量的巨噬細(xì)胞浸潤(rùn),被稱為腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(Tumor-associated macrophages,TAMs)。既往研究認(rèn)為T(mén)AMs具有重要的抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用,可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞,或者通過(guò)遞呈腫瘤相關(guān)抗原誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答清除腫瘤細(xì)胞。早期研究發(fā)現(xiàn)腫瘤組織浸潤(rùn)的 TAMs釋放多種細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、趨化因子參與基質(zhì)重建、腫瘤微血管、微淋巴管生成、發(fā)揮免疫抑制和逃逸等多種機(jī)制促進(jìn)腫瘤的發(fā)展、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移,與生存

2、密切相關(guān)。隨著研究深入,學(xué)者們認(rèn)識(shí)到 TAMs在不同的腫瘤微環(huán)境刺激下發(fā)生不同性質(zhì)的活化,包括2種類型:(1)經(jīng)典活化的巨噬細(xì)胞,又稱M1巨噬細(xì)胞,具有抑制和殺傷腫瘤細(xì)胞的作用；(2)替代性活化的巨噬細(xì)胞,又稱M2巨噬細(xì)胞,主要促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。既往研究認(rèn)為腫瘤組織CD68標(biāo)記的巨噬細(xì)胞即TAMs,近年有研究表明 TAMs更傾向于CD163標(biāo)記M2巨噬細(xì)胞,M2巨噬細(xì)胞具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、存活、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的作用,從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、

3、發(fā)展,影響患者的生存時(shí)間及預(yù)后。
　　 本研究采用非生物素免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)117例食管癌患者癌組織和30例癌旁正常組織CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)密度,結(jié)合患者的臨床病理特征和隨訪資料,探討食管癌組織微環(huán)境中CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)密度與食管癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生存時(shí)間的關(guān)系,分析食管癌不同微環(huán)境中其浸潤(rùn)密度對(duì)患者預(yù)后的影響。
　　 材料和方法：收集2004年1月至2005年5月河南省腫瘤

4、醫(yī)院和鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院手術(shù)切除、病理確診、有完整臨床和隨訪資料的食管癌組織標(biāo)本117例,且所有病例術(shù)前未接受任何治療,同時(shí)搜集30例癌旁正常組織標(biāo)本作對(duì)照。運(yùn)用非生物素二步免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞在食管癌組織及癌旁正常組織的浸潤(rùn)。采用SPSS16.0數(shù)據(jù)軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和處理。食管癌組織和癌旁正常組織CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度先進(jìn)性方差齊性檢驗(yàn),再進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；癌組織巨噬細(xì)胞的浸

5、潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生存時(shí)間的關(guān)系進(jìn)行Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn),Kaplan-Meier法繪制生存曲線,用Cox回歸模型進(jìn)行多因素生存分析,各病理參數(shù)的關(guān)系采用X2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞在癌旁正常組織與食管癌組織浸潤(rùn)密度的比較癌旁正常組織CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)密度均數(shù)分別為(3.9±2.6)個(gè)／HP vs(2.3±1.6)個(gè)／H

6、P；食管癌癌組織均數(shù)分別為(36.2±15.5)個(gè)／HP vs(28.5±12.8)個(gè)／HP。食管癌組織CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度較癌旁正常組織明顯增加(P=0.000;P=0.000).差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。食管癌組織CD68+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度多于CD163+巨噬細(xì)胞,配對(duì)相關(guān)性檢驗(yàn)示二者密切相關(guān)(P=0.000),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.食管癌組織不同微環(huán)境中CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

7、移、生存時(shí)間的關(guān)系及單因素生存分析
　　 2.1食管癌組織(癌巢+癌間質(zhì))CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生存時(shí)間的關(guān)系及單因素生存分析食管癌組織(癌巢+癌間質(zhì))CD68+巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)密度均數(shù)為(36.22±15.50)個(gè)／HP。癌巢+癌間質(zhì)CD68+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(P=0.000)；與生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)(P=0.002),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5年生存率高密度組低于低密度組,分別為30

8、.5％vs56.9％(P=0.005),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 食管癌組織(癌巢+癌間質(zhì))CD163+巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)密度均數(shù)為(28.50±12.80)個(gè)／HP。癌巢+癌間質(zhì)CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)[P=0.000)；與生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)(P=0.000),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5年生存率高密度組明顯低于低密度組,分別為27.1％ vs60.3％(P=0.000),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.2食

9、管癌癌間質(zhì)CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生存時(shí)間的關(guān)系及單因素生存分析食管癌癌間質(zhì)CD68+巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)密度均數(shù)為(29.26±13.47)個(gè)／HP。癌間質(zhì)CD68+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(P=0.000)；與生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)(P=0.000),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5年生存率高密度組明顯低于低密度組,分別為27.1％vs60.3％(P=0.000),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 食管癌組織癌間

10、質(zhì)CD163+巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)密度均數(shù)為(23.09.±0.92)個(gè)／HP。間質(zhì)CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(P=0.000)；與生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)(P=0.001),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5年生存率高密度組明顯低于低密度組,分別為33.9％vs53.4％(P=0.032),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.3食管癌癌巢CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生存時(shí)間的關(guān)系及單因素生存分析食管癌癌巢CD6

11、8+巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)密度均數(shù)為(6.85±4.42)個(gè)／HP。癌巢CD68+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)性(P=0.101)；生存時(shí)間無(wú)相關(guān)性(P=0.081),差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5年生存率高密度組明顯高于低密度組,分別為64.4％ vs22.4％(P=0.000),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 食管癌組織癌巢CD163+巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)密度均數(shù)為(5.26±0.47)個(gè)／HP。CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(

12、P=0.000),與生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)(P=0.000),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Kaplan-Meier生存曲線示5年生存率高密度組明顯低于低密度組分別為30.5％vs56.9％(P=0.002),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.食管癌預(yù)后Cox模型多因素回歸分析Cox多因素回歸分析顯示,獨(dú)立的預(yù)后因素為食管癌間質(zhì)、癌巢的CD163+巨噬細(xì)胞(P=0.023；P=0.000)及癌巢CD68+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度(P=0.000)以及淋巴結(jié)

13、轉(zhuǎn)移(P=0.000),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1.食管癌組織CD68+、CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)密度明顯高于癌旁正常組織。
　　 2.食管癌組織不同微環(huán)境中CD68+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)對(duì)腫瘤的作用可能是雙向的,癌巢中具有抗腫瘤作用,而癌間質(zhì)主要促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。
　　 3.食管癌組織不同微環(huán)境CD163+巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)促進(jìn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,縮短生存時(shí)間,是較差的預(yù)后因素。
　　 4.食管癌組織