大鼠耳蝸氨基糖甙類藥物損傷后出現(xiàn)的新細胞.pdf

1、目的:對大鼠耳蝸藥物損傷后出現(xiàn)的新細胞與小膠質(zhì)細胞、非典型細胞(atypical cell)進行比較和擴展研究,探討新細胞的代表性及其起源、轉(zhuǎn)歸、以及與神經(jīng)干細胞或nestin(+)前體細胞的關(guān)系.方法:采用經(jīng)典的小膠質(zhì)細胞特殊染色方法——銀染法(Hortega氏碳酸銀法)對大鼠耳蝸藥物損傷后出現(xiàn)的新細胞進行研究;通過透射電鏡與Marc Lenoir和Philippe Vago實驗動物模型中的"非典型細胞(atypical cell)"

2、進行了比較與擴展研究;運用逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)(RT-PCR)檢測耳蝸基底膜上神經(jīng)干細胞標志物nestin的表達情況,對新細胞的來源及其與神經(jīng)干細胞或nestin(+)的前體細胞的關(guān)系作進一步研究.結(jié)果:小膠質(zhì)細胞特殊銀染法光鏡下觀察結(jié)果顯示:作為陽性對照的大鼠腦組織切片中小膠質(zhì)細胞與經(jīng)典組織學描述之分布、形態(tài)相符合,而耳蝸中軸切片未見有類似于小膠質(zhì)細胞的細胞著色.與Marc Lenoir和Philippe Vago實驗動物模型中的"非典型

3、細胞(atypical cell)"進行的比較與擴展研究顯示:新細胞在超微結(jié)構(gòu)方面與非典型細胞存在明顯不同;新細胞在SD大鼠(幼年和成年)、Wistar大鼠(幼年和成年)與新霉素、阿米卡星藥物的多種交叉比較模型中都重復出現(xiàn),且超微結(jié)構(gòu)方面無明顯差異.耳蝸基底膜上神經(jīng)干細胞標志物nestin的表達情況研究發(fā)現(xiàn)在藥物組16天齡大鼠耳蝸基底膜中nestin表達仍呈陽性,而同期正常對照組nestin表達呈陰性.結(jié)論:銀染法不支持新細胞是小膠質(zhì)細

4、胞的假說;結(jié)合以往免疫組化(白細胞共同抗原LCA,CD45)研究的陰性結(jié)果,認為可以初步排除小膠質(zhì)細胞的可能.排除了與Marc Lenoir和Philippe Vago實驗動物模型中的"非典型細胞(atypical cell)"為同一細胞的可能性.認為新細胞在大鼠耳蝸中出現(xiàn)與耳蝸發(fā)育程度不完全相關(guān),具有較廣泛的代表性.其最早出現(xiàn)時間為用藥過程中的第4天.支持新細胞是以往研究中所未曾發(fā)現(xiàn)的一類非凋亡細胞的推論.形態(tài)學上需要與另一類高電子密