大黃素對肝癌細胞AIF和EndoG蛋白表達的影響.pdf

1、背景與目的：原發(fā)性肝癌是臨床常見的惡性腫瘤，具有起病隱匿、進展迅速、高度惡性、易轉移復發(fā)、治療難度大、生存期短等特點，其總體的相對5年生存率較低，且有低齡化趨勢，嚴重威脅人類生命健康。祖國醫(yī)學認為肝癌屬于“積聚”、“癥瘕”、“黃疸”等范疇，經(jīng)過長期的臨床實踐和探索，在防治肝癌復發(fā)、轉移以及改善中晚期肝癌患者的癥狀、提高生存質(zhì)量、延長生存期等方面具有優(yōu)勢。在以往治療肝癌的效方中，大黃是出現(xiàn)頻率最高的單味中藥，其有效性已得到普遍的認可和重視

2、?，F(xiàn)代基礎研究發(fā)現(xiàn)，大黃素是大黃的重要有效單體，可通過多種機制發(fā)揮抗腫瘤作用，其中誘導腫瘤細胞凋亡是其重要的抗腫瘤作用機制之一。凋亡機制研究發(fā)現(xiàn)，在抑制了介導細胞凋亡的主要分子半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase）之后，細胞凋亡仍然可以發(fā)生。而線粒體膜間蛋白凋亡誘導因子（AIF）和核酸內(nèi)切酶G（Endo G）可以直接介導核內(nèi)凋亡發(fā)生，是非Caspase依賴的凋亡通路的重要標志。既往研究發(fā)現(xiàn)大黃素可通過Caspase依賴途徑誘導肝癌細胞凋亡

3、，但是否還可以通過誘導線粒體膜間蛋白凋亡誘導因子及核酸內(nèi)切酶G表達、釋放及核轉位，直接降解DNA，引起肝癌細胞非Caspase依賴的凋亡尚未見報道。本實驗擬通過觀察大黃素干預后肝癌細胞AIF和EndoG蛋白表達的變化，初步探討大黃素對肝癌細胞非Caspase依賴凋亡通路的影響。 方法：將體外培養(yǎng)的CBRH-7919及HepG2兩種肝癌細胞各分為四組，分別為空白對照組、Caspase抑制劑組、大黃素干預組、大黃素+Caspase抑

4、制劑組；取對數(shù)生長期的細胞進行實驗，藥物作用48小時后提取各組細胞胞漿及胞核蛋白；采用Western blot法分別檢測各組細胞胞漿和胞核內(nèi)AIF與EndoG的表達，進行統(tǒng)計學分析。 結果：AIF和EndoG在大黃素干預組、大黃素+Caspase抑制劑組細胞胞漿和胞核的表達均高于空白對照組及Caspase抑制劑組，其中以大黃素+ Caspase抑制劑組的表達最高。 結論：大黃素能促進體外培養(yǎng)的大鼠肝癌CBRH-7919細