快速右房起搏誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性豬心動過速性心肌病心肌蛋白表達(dá)異常的初步研究.pdf

1、目的：通過快速右房起搏構(gòu)建豬心動過速性心肌病(tachycardiomyopathy,TCM)模型，評估心動過速對左室舒縮功能及射血分?jǐn)?shù)的影響；采用蛋白質(zhì)組學(xué)初步篩選左室心室肌差異表達(dá)蛋白，并研究其差異蛋白及其上下游蛋白的表達(dá)情況，探討其可能與TCM關(guān)系。
　　 方法：18只健康小豬隨機(jī)分為3組(n=6)：分別為空白對照(Control)組、假手術(shù)（Sham）組、快速心房起搏(TCM)組。快速心房起搏組安置起搏器，給予500次/

2、min的快速右心房起搏2周，制成心動過速性心肌病實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停患偈中g(shù)（Sham）組安置起搏器(AOO)但不予起搏；Control組不予任何處理，各組均給予相同條件下喂養(yǎng)2周。飼養(yǎng)期間觀察各組實(shí)驗(yàn)動物一般狀況；實(shí)驗(yàn)前后經(jīng)胸心臟超聲觀測豬左心室舒張末期內(nèi)徑(LVDd)和射血分?jǐn)?shù)（EF值）大小變化，宏觀的探討心臟大體結(jié)構(gòu)形態(tài)和功能的變化；2周后處死實(shí)驗(yàn)動物，通過HE染色觀察心室肌病理改變；然后通過蛋白質(zhì)雙向電泳和銀染后篩選差異表達(dá)蛋白，使用串聯(lián)飛

3、行質(zhì)譜分析鑒定蛋白質(zhì)，采用Western Blot技術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證其通路上下游蛋白質(zhì)的表達(dá)。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)動物經(jīng)過快速起搏2周后，TCM組左室舒張木期內(nèi)徑顯著增加，射血分?jǐn)?shù)顯著減少，較實(shí)驗(yàn)開始及對照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；HE染色可見TCM組心室組織細(xì)胞排列紊亂，出現(xiàn)局灶性壞死，間質(zhì)膠原結(jié)締組織增生；蛋白質(zhì)組學(xué)初步鑒定出熱休克蛋白-27在TCM表達(dá)增加，14-3-3蛋白、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced ni

4、co-tinamide adenine dinucleotide， NADH)、真核生物翻譯起始因子5A(translation initiation factor5A， elF5A)等差異表達(dá)蛋白在TCM組表達(dá)減少，使用Western生物學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)p-ERK表達(dá)在TCM明顯增加。
　　 結(jié)論：1．快速右房起搏導(dǎo)致左室舒張功能障礙、心室組織出現(xiàn)心肌重構(gòu)等表現(xiàn)。2．快速右房起搏是建立TCM有效的方法。3.ERKs、Hsp27、NA