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文檔簡(jiǎn)介
1、器官移植是二十一世紀(jì)醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)問(wèn)題,近些年來(lái)已經(jīng)取得了很大的進(jìn)展。如何建立供體特異性的移植免疫耐受,從而避免因長(zhǎng)期使用免疫抑制藥物而產(chǎn)生的問(wèn)題,在器官移植領(lǐng)域的研究中倍受關(guān)注。在對(duì)于免疫耐受機(jī)制的研究過(guò)程中,研究者們發(fā)現(xiàn),調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是一類具有抑制免疫應(yīng)答功能的細(xì)胞亞群,對(duì)維持免疫應(yīng)答和免疫耐受之間的平衡起重要作用,大量增殖的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞能夠誘導(dǎo)免疫耐受。Notch信號(hào)通路是現(xiàn)階段發(fā)育學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)等領(lǐng)域的研究熱點(diǎn),對(duì)于多種組織
2、的發(fā)育、免疫系統(tǒng)細(xì)胞的生長(zhǎng)分化、腫瘤發(fā)生等方面起著重要作用。關(guān)于Notch信號(hào)通路誘導(dǎo)器官移植免疫耐受方面的研究,國(guó)際上尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道。
本實(shí)驗(yàn)在已有的工作基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究造血干細(xì)胞移植誘導(dǎo)免疫耐受的機(jī)制,通過(guò)對(duì)Notch信號(hào)通路中特異性配體Jagged2的表達(dá)檢測(cè),研究Notch信號(hào)通路在造血干/祖細(xì)胞移植誘導(dǎo)免疫耐受過(guò)程中所起的作用。
目的:建立小鼠頸部異位心臟移植模型,研究Notch信號(hào)通路在同基因造血干/祖細(xì)
3、胞移植誘導(dǎo)免疫耐受過(guò)程中的作用,探索一種安全可靠的誘導(dǎo)特異性器官移植免疫耐受的可行方法。
方法:將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為4組:A、B組行造血祖細(xì)胞移植,其中B組應(yīng)用Notch信號(hào)特異性阻滯劑DAPT,C組行造血干細(xì)胞移植,D組單純行心臟移植。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Notch配體Jagged2在造血干/祖細(xì)胞中的表達(dá)。進(jìn)行造血干/祖細(xì)胞移植后,建立小鼠頸部異位心臟移植模型,觀察心臟移植物的存活情況,繪制Kaplan-Meier生存曲線,比較各
4、組心臟移植物存活時(shí)間的差別。對(duì)移植心臟組織切片HE、Masson染色,比較各組病理學(xué)改變。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的百分率,混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)檢測(cè)誘導(dǎo)耐受的特異性及效能。
結(jié)果:
1.Jagged2+細(xì)胞在A、B組(造血祖細(xì)胞)的百分比分別為59.6±3.5、60.2±4.1,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p>0.05;在C組(造血干細(xì)胞)的百分比為32.8±3.2,與A、B組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p<0.05。
5、 2.Kaplan-Meier生存曲線顯示,各組間心臟移植物存活時(shí)間有顯著差異,A組有62.5%的移植物長(zhǎng)期存活(存活時(shí)間超過(guò)100d),而其他各組無(wú)一例長(zhǎng)期存活。
3.D組病理學(xué)改變?yōu)榧毙耘懦夥磻?yīng),A、C組心臟移植物在1wk內(nèi)無(wú)明顯病理學(xué)改變。B組表現(xiàn)為心肌細(xì)胞腫大、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)增多。
4.流式細(xì)胞術(shù)顯示心臟移植后受體外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞百分率逐漸升高,到第4wk達(dá)到最高,而后又降低,A組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞
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