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文檔簡介
1、研究目的: 建立RQ-PCR(rea-time quantitative PCR)檢測大腸桿菌(Escherichia coli.E.coli)DNA的方法并初步用于臨床血標(biāo)本檢測。以大腸桿菌B-右旋半乳糖苷酶基因為靶基因設(shè)計引物和探針,制備重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品,對26份外科發(fā)熱患者血及其他體液標(biāo)本定量檢測。結(jié)果顯示引物和探針特異性好,樣本檢測平均準(zhǔn)確性為(112.19±7.48)%;批內(nèi)及批間重復(fù)性平均變異系數(shù)分別為(16.33±4
2、.8)%和(16.03±7.8)%。通過40例健康志愿者靜脈全血檢測人為制定出陽性檢出限為16拷貝/反應(yīng)孔。31例外科發(fā)熱患者74份血標(biāo)本的大腸桿菌陽性檢出率,培養(yǎng)為2.78%(2/72),RQ-PCR為51.35%(38/74),差異顯著(P
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