牛瑟氏泰勒蟲(chóng)二溫式PCR快速檢測(cè)技術(shù)的建立及初步應(yīng)用.pdf

1、牛瑟氏泰勒蟲(chóng)（Theileriasergenti）主要寄生于牛紅細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及牛淋巴細(xì)胞內(nèi)?？梢鸬闹饕Y狀為高熱、貧血、消瘦和體表淋巴結(jié)腫大。隨著世界經(jīng)濟(jì)貿(mào)易的高速蓬勃發(fā)展，養(yǎng)牛業(yè)市場(chǎng)交易的日趨規(guī)?；Ｉ咸├障x(chóng)病的流行區(qū)域范圍不斷擴(kuò)大。近年來(lái)該病的發(fā)病率和死亡率呈上升趨勢(shì)，給相關(guān)國(guó)家的養(yǎng)牛業(yè)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，已成為嚴(yán)重危害畜牧業(yè)健康發(fā)展的重要疾病之一。
　　目前，GenBank上已發(fā)表的牛瑟氏泰勒蟲(chóng)的基因較多，其中P

2、23表面蛋白基因可用于牛瑟氏泰勒蟲(chóng)的的診斷。為建立一種牛瑟氏泰勒蟲(chóng)快速檢測(cè)技術(shù)，本試驗(yàn)根據(jù)GenBank上已發(fā)表的牛瑟氏泰勒蟲(chóng)P23表面蛋白基因序列（D84447）設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物，擴(kuò)增出大小為244 bp的基因片段，經(jīng)克隆、測(cè)序分析，與已知基因序列同源性為100％。經(jīng)敏感性試驗(yàn)、特異性試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、對(duì)比試驗(yàn)，結(jié)果表明所建立的牛瑟氏泰勒蟲(chóng)二溫式PCR能檢測(cè)出的最高敏感度為171 fg/μL，不與牛新孢子蟲(chóng)、弓形蟲(chóng)RH株和卵形巴貝斯