肝細(xì)胞癌CpG島甲基化譜與臨床病理關(guān)系.pdf

1、肝細(xì)胞癌(HCC)的發(fā)生發(fā)展是多階段(從炎癥感染、組織纖維化、慢性肝硬化至肝癌)、多致瘤因素累積的過程,盡管近年來對肝癌發(fā)生發(fā)展的病理研究已取得很大進(jìn)展,但對其分子機(jī)制的理解仍然有限。在許多信號途徑和不同類型的腫瘤組織中,腫瘤相關(guān)基因的啟動子甲基化異常現(xiàn)象相當(dāng)普遍,腫瘤細(xì)胞中靶向5-胞嘧啶-DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)改變已經(jīng)成為腫瘤分子病理研究的熱點。
　　DNA啟動子區(qū)甲基化沉默腫瘤相關(guān)基因的表達(dá),在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)

2、揮重要作用。但早期的研究多集中于單個基因的研究,對于甲基化如何產(chǎn)生、為什么產(chǎn)生及何時產(chǎn)生仍不清楚。多基因啟動子區(qū)甲基化所形成的甲基化譜能夠提供不同類型腫瘤細(xì)胞的豐富信息。CpG島甲基化譜(CIMP),即多基因同時甲基化,已經(jīng)成為腫瘤的一種新型分子標(biāo)志。CIMP+腫瘤具有明顯的流行病學(xué)特點、組織學(xué)特征、癌前病變及分子特征,已經(jīng)在許多類型腫瘤中得到研究。CIMP可能因啟動子區(qū)甲基化同時影響多基因的表達(dá),雖然分析CIMP對于理解腫瘤全面地表觀

3、遺傳學(xué)改變有重要意義,但對HCC病例的CIMP研究卻很少。
　　P14(p14ARF), P15(p15INK4b), P16(p16INK4a), P53, RB1(retinoblastoma1), ER(estrogen receptor), WTI(Wilms tumor1), RASSF1A(Ras association domain family1)和c-Myc基因啟動子甲基化已經(jīng)在多數(shù)腫瘤中表現(xiàn)高甲基化修飾,是重要

4、的腫瘤相關(guān)基因。為深入理解肝癌形成中甲基化所扮演的重要角色,本研究中我們采用MSP(methylation-specific PCR)方法檢測以上九種基因在50例HCC組織、50例癌旁組織和6例正常肝組織中啟動子甲基化修飾狀況。組織中出現(xiàn)5個或5個以上基因同時甲基化則被定義為CIMP+,低于5個基因同時甲基化則被定義為CIMP-,觀察CIMP的分布情況。
　　研究發(fā)現(xiàn),這九種基因在HCC組織中的啟動子甲基化頻率從P53的10％至c

5、-Myc的94%不等,其中HCC組織中P14、P15、P16、ER、RASSF1A、WT1和c-Myc基因甲基化頻率明顯高于癌旁組織(p<0.05)。96%的HCC組織有一個或一個以上基因同時甲基化。HCC組織中 CIMP+明顯高于癌旁組織(70%和12%,p<0.001),正常肝組織中不存在CIMP+。CIMP+組織中,六種基因(P14, P15, P16, ER, RSAAF1A和WT1)甲基化頻率要高于CIMP-組織(p<0.05

6、),有可能成為CIMP特異性基因。CIMP與HCC多數(shù)臨床病理參數(shù)間沒有相關(guān)性,但與血清甲胎蛋白(AFP)水平上升有關(guān)(p=0.001)。CIMP+更多地出現(xiàn)AFP≥30ug/l的HCC患者中(p=0.005)。P15和P16基因甲基化介導(dǎo)的CIMP與血清AFP上調(diào)有關(guān)(p<0.05)。
　　研究結(jié)果提示,多腫瘤相關(guān)基因啟動子區(qū)同時甲基化在腫瘤發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色,CIMP在HCC的多階段形成中有重要作用。P15和P16基因甲基