骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的IDO對小鼠異基因骨髓移植中aGVHD效應(yīng)影響的實驗研究.pdf

1、近30年來，異基因骨髓移植(a1logeneicbonemarrowtransplantation，Allo-BMT)已經(jīng)成功應(yīng)用于治療惡性血液病、嚴(yán)重免疫缺陷病和骨髓造血功能衰竭等疾病。至今為止，急性移植物抗宿主病(acutegraft-versus-hostdisease，aGVHD)仍是移植相關(guān)死亡的主要原因，是移植的主要障礙。特別是在接受HLA配型不全相合的無關(guān)供者移植的患者中，常發(fā)生嚴(yán)重的急性GVHD。雖然應(yīng)用免疫抑制藥物和T

2、細(xì)胞去除的方法能有效的控制GVHD，但治療的同時會引起嚴(yán)重的并發(fā)癥，比如感染和增加疾病復(fù)發(fā)風(fēng)險。因此許多研究者一直致力于尋找一些防止GVHD發(fā)生并能避免免疫抑制引起的并發(fā)癥的方法。 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstemcells，MSCs)是骨髓中能分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成肌細(xì)胞，具有多向分化潛能的細(xì)胞。研究已經(jīng)證實MSCs能產(chǎn)生許多促進造血細(xì)胞歸巢、增殖和分化的細(xì)胞因子，因此在促進造血恢復(fù)中發(fā)揮重要的作用。而且

3、，MSCs不表達MHCⅡ類分子或共刺激分子，具有較弱的抗原性。研究也表明MSCs具有免疫調(diào)節(jié)的特性，可以減輕GVHD。但對于MSCs發(fā)揮免疫負(fù)調(diào)節(jié)作用、減輕GVHD的機制仍不清楚。 吲哚胺2，3-過氧化酶(indoleamine2,3-dioxygenaseIDO)是色氨酸沿犬尿氨酸代謝途徑降解的限速酶.可以降解T細(xì)胞周圍的色氨酸。而T細(xì)胞的細(xì)胞周期中有一個對周圍色氨酸水平極為敏感的調(diào)節(jié)點，色氨酸的缺乏使其停滯在mid-G1期，

4、從而抑制活化的T細(xì)胞的增殖。在IFN-γ的作用下，機體內(nèi)的多種細(xì)胞如成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞均可產(chǎn)生IDO。近來，人們還發(fā)現(xiàn)母胎界面滋養(yǎng)層細(xì)胞中IDO在避免胎兒受母體排斥中具有重要作用。因此，抗原提呈細(xì)胞上的IDO被公認(rèn)為抑制機體T細(xì)胞對異體抗原發(fā)生免疫應(yīng)答的主要機制之一。 第一部分:小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及其生物學(xué)特性的研究 目的：探討小鼠骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的體外分離、純化、擴增和多向分化

5、條件。 結(jié)論：體外成功地分離及培養(yǎng)了小鼠MSCs。 第二部分:IDO在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的表達及對T細(xì)胞增殖的影響 目的：探討γ-干擾素(IFN-γ)作用下小鼠MSCs上吲哚胺2，3-雙加氧酶(IDO)表達情況及其活性對異基因T淋巴細(xì)胞增殖的影響。 結(jié)論：MSCs上的IDO表達與T淋巴細(xì)胞的增殖密切相關(guān)，MSCs在體外可能通過IDO活性發(fā)揮免疫抑制作用。 第三部分:小鼠異基因骨髓移植急性移植物抗

6、宿主病模型的建立 目的：建立小鼠異基因骨髓移植急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型，為下一步異基因骨髓移植中aGVHD研究提供理想的實驗參照。 結(jié)論：成功地建立了小鼠異基因骨髓移植急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型。 第四部分:MSCs的IDO對小鼠異基因骨髓移植中aGVHD效應(yīng)的影響 目的：觀察具有IDO表達的MSCs在小鼠異基因骨髓移植中降低aGVHD發(fā)生的體內(nèi)效果，探討MSCs上的IDO活性參與其