益氣解毒法干預(yù)UC復(fù)發(fā)率的系統(tǒng)評(píng)價(jià)及其維持腸上皮細(xì)胞自噬的機(jī)制研究.pdf

1、潰瘍性結(jié)腸炎臨床以腹痛、腹瀉伴黏液膿血便為主要特征，因其病程遷延難愈，被認(rèn)為是世界難治病之一。臨床上多采用美沙拉嗪、柳氮磺吡啶等藥物來(lái)治療，目前尚無(wú)根治本病的特效藥。潰瘍性結(jié)腸炎屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)的“久痢”、“休息痢”等范疇，在中醫(yī)理論指導(dǎo)下運(yùn)用益氣解毒法治療本病可起到減毒增效的作用，且具有不良反應(yīng)少的優(yōu)勢(shì)，利用中醫(yī)藥治療潰瘍性結(jié)腸炎具有廣闊的發(fā)展前景。
　　目的:
　　本課題通過(guò)文獻(xiàn)研究、系統(tǒng)評(píng)價(jià)和Meta分析，為益氣解毒法干預(yù)

2、潰瘍性結(jié)腸炎復(fù)發(fā)率提供循證依據(jù)。進(jìn)而采用益氣解毒方藥干預(yù)致病菌入侵腸上皮細(xì)胞模型，結(jié)合miRNAs/ATG調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，探討益氣解毒方藥維持腸上皮細(xì)胞自噬的可能機(jī)制。
　　方法:
　　系統(tǒng)評(píng)價(jià)部分通過(guò)檢索國(guó)內(nèi)外公開(kāi)發(fā)表的關(guān)于益氣解毒方藥治療潰瘍性結(jié)腸炎的臨床隨機(jī)對(duì)照研究，根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)，篩選并納入以中醫(yī)益氣解毒法或聯(lián)合西藥為試驗(yàn)組，以單純西藥治療為對(duì)照組，并對(duì)復(fù)發(fā)率進(jìn)行報(bào)道的研究。提取詳細(xì)相關(guān)信息進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)。采用Rev

3、iew Manager5.0軟件對(duì)其綜合療效總有效率、復(fù)發(fā)率進(jìn)行Meta分析，以獲取益氣解毒法干預(yù)潰瘍性結(jié)腸炎復(fù)發(fā)率的客觀評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)研究部分通過(guò)建立福氏志賀菌(GIM1.539)感染體外腸上皮細(xì)胞(HCT116)模型，轉(zhuǎn)染miR130a模擬體及反義模擬體，接受大鼠益氣解毒方藥含藥血清干預(yù)。對(duì)比不同干預(yù)方式和不同轉(zhuǎn)染方案下，自噬基因ATG16L1蛋白含量及基因表達(dá)、LC3蛋白含量和miR130a基因表達(dá)水平，結(jié)合miRNAs/ATG調(diào)控網(wǎng)

4、絡(luò)，以期為益氣解毒方藥維持腸上皮細(xì)胞自噬的機(jī)制尋找依據(jù)。
　　結(jié)果:
　　系統(tǒng)評(píng)價(jià)部分共納入的17篇臨床隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)均采用平行隨機(jī)對(duì)照設(shè)計(jì)。研究對(duì)象均為門(mén)診或住院病歷，共納入1185例患者。所有納入的文獻(xiàn)皆注明西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)、中醫(yī)辨證分型標(biāo)準(zhǔn)和療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，基本遵守循證醫(yī)學(xué)的原則，研究結(jié)果較可靠。參照J(rèn)adad文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)所納入的17篇文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)分，雖然7個(gè)研究為高質(zhì)量文獻(xiàn)，但是基本上都因?yàn)闆](méi)有采用隨機(jī)化隱藏或盲法，

5、評(píng)分偏低，因此可能影響研究結(jié)果的可信度。關(guān)于綜合療效總有效率的Meta分析，納入的5項(xiàng)研究合并效應(yīng)量RR=1.25，95％CI[1.15，1.37]，Z=5.03，P＜0.00001，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義且差異顯著，提示益氣解毒方藥口服治療UC綜合療效的總有效率效果顯著優(yōu)于單純西藥治療;納入的7項(xiàng)研究合并效應(yīng)量RR=1.19，95％CI[1.10，1.28]，Z=4.46，P＜0.00001，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義且差異顯著，提示益氣解毒方藥口服

6、加中藥灌腸對(duì)照西藥治療對(duì)于UC綜合療效的總有效率效果顯著優(yōu)于單純西藥治療;納入的3項(xiàng)研究合并效應(yīng)量RR=1.32，95％CI[1.14，1.52]，Z=3.79，P=0.0002＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示益氣解毒中西醫(yī)結(jié)合療法對(duì)照西藥治療對(duì)于UC綜合療效的總有效率效果優(yōu)于單純西藥治療。復(fù)發(fā)率的Meta分析中納入的5項(xiàng)研究合并效應(yīng)量RR=0.21，95％CI[0.14，0.33]，Z=6.93，P＜0.00001，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

7、，提示益氣解毒方藥口服干預(yù)UC復(fù)發(fā)率效果優(yōu)于單純西藥治療;納入的7項(xiàng)研究合并效應(yīng)量RR=0.27，95％CI[0.19，0.38]，Z=7.18，P＜0.00001，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示益氣解毒方藥口服加中藥灌腸干預(yù)UC復(fù)發(fā)率效果優(yōu)于單純西藥治療。關(guān)于綜合療效總有效率和復(fù)發(fā)率的發(fā)表偏倚RR漏斗圖基本中線(xiàn)兩側(cè)皆有分布，但存在不同程度的偏態(tài)分布，提示Meta分析結(jié)果可能受發(fā)表偏倚的影響。關(guān)于安全性事件的報(bào)道試驗(yàn)組共11例、對(duì)照組共19例;

8、關(guān)于不良反應(yīng)報(bào)道，試驗(yàn)組共3例，對(duì)照組共42例，提示中醫(yī)益氣解毒療法較西藥具有安全性高、不良反應(yīng)少的優(yōu)勢(shì)。
　　實(shí)驗(yàn)研究部分研究結(jié)果顯示大鼠益氣解毒方藥含藥血清干預(yù)方式下各組ATG16L1、LC3蛋白含量均較同組無(wú)藥血清干預(yù)方式增多，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;含藥血清干預(yù)方式下各組ATG16L1的基因表達(dá)較同組無(wú)藥血清上升，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;含藥血清干預(yù)方式下各組miR130a的基因表達(dá)較同組無(wú)藥血清下

9、降，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。根據(jù)不同轉(zhuǎn)染方案分組，結(jié)果顯示無(wú)論何種干預(yù)方式，miR130a模擬物組分別與空白轉(zhuǎn)染組比較，miR130a模擬物組ATG16L1、LC3蛋白含量均明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;miR130a反義模擬物組分別與空白轉(zhuǎn)染組比較，miR130a反義模擬物組ATG16L1、LC3蛋白含量均明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;兩種干預(yù)方式下，miR130a模擬物組分別與相同干預(yù)方式空白

10、轉(zhuǎn)染組比較，miR130a模擬物組的miR130a的基因表達(dá)明顯上升、ATG16L1的基因表達(dá)明顯上升下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;兩種干預(yù)方式下，miR130a反義模擬物組分別與相同干預(yù)方式的空白轉(zhuǎn)染組比較，miR130a反義模擬物組的miR130a的基因表達(dá)明顯下降、ATG16L1的基因表達(dá)明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　益氣解毒法治療潰瘍性結(jié)腸炎在綜合療效和控制復(fù)發(fā)率方面臨床療效