FSGS大鼠腎臟TGF-β1及VEGF的表達(dá)及羅格列酮的干預(yù)作用.pdf

1、目的：1、觀察轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在局灶節(jié)段性腎小球硬化(FSGS)大鼠腎組織中的表達(dá)，并研究?jī)杉?xì)胞因子在FSGS發(fā)生發(fā)展中的作用；2、觀察羅格列酮對(duì)FSGS大鼠腎保護(hù)作用，探討其可能的機(jī)制。 方法：選取健康雄性Wistar大鼠22只，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周(0周)后，隨機(jī)分為3組：正常對(duì)照組(A組，n=6)，模型組(B組，n=8)，及羅格列酮治療組(C組，n=8)。除正常對(duì)照組外，余16只大

2、鼠采用單側(cè)腎切除加尾靜脈分次注射阿霉素法建立FSGS大鼠模型。羅格列酮治療組于第4周開始給予治療，每日予羅格列酮5mg/kg，配成水溶液灌胃。于實(shí)驗(yàn)第0周、4周、6周、8周分別測(cè)定24小時(shí)尿蛋白排泄量(24hUP)、尿肌酐(Ucr)，血總蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、膽固醇(Cho)、尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)等生化指標(biāo)，計(jì)算內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)。于實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取剩余腎做光鏡檢查，檢測(cè)腎小球硬化指數(shù)(SI)、腎小球細(xì)胞外基質(zhì)(

3、ECM)與腎小球面積(GA)之比值(ECM/GA)，評(píng)估腎小球及腎小管間質(zhì)病變積分；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腎臟組織中TGF-β1，VEGF的表達(dá)。 結(jié)果： 1、血、尿生化值： (1)FSGS大鼠模型建立：于實(shí)驗(yàn)4、6、8周時(shí)，與正常對(duì)照組比較，模型組與羅格列酮治療組大鼠24hUP、Cho、BUN均顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血清TP、Alb及Ccr與正常對(duì)照組比較均顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (2)羅格列酮

4、治療組生化值改變：實(shí)驗(yàn)6周時(shí)，與模型組比較，羅格列酮治療組大鼠Cho即降低，血清TP升高差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)；實(shí)驗(yàn)8周時(shí)，與模型組比較，羅格列酮治療組大鼠24hUP和Cho均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.001)血清TP、Alb及Ccr均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.01，P<001)。 2、病理學(xué)觀察： (1)光鏡下可見：模型組部分腎小球可見毛細(xì)血管袢塌陷，管腔閉塞，系膜

5、細(xì)胞及基質(zhì)增生，球囊粘連，部分腎小球代償性肥大；腎小管上皮細(xì)胞腫脹、變性，間質(zhì)灶狀炎細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維化，可見腎小管內(nèi)蛋白管型。羅格列酮治療組腎小球毛細(xì)血管開放較好，間質(zhì)纖維化及炎細(xì)胞浸潤(rùn)程度較模型組明顯減輕。 (2)腎小球硬化指數(shù)(SI)：與模型組相比，羅格列酮治療組SI降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 (3)腎小球細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)/腎小球面積(GA)：與模型組相比，羅格列酮治療組ECM/GA明顯降低，差異有統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。 (4)腎小球、腎小管間質(zhì)病變：與模型組比較，羅格列酮治療組腎小球及腎間質(zhì)損害評(píng)分明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<001，P<0.01)。 3、免疫組化結(jié)果顯示：(1)TGF-β1：與模型組相比，羅格列酮治療組腎小球TGF-β1的表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。模型組、羅格列酮治療組與正常對(duì)照組比較腎小管間質(zhì)TGF-β1表達(dá)增多，組間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (2)VEGF：

7、各組大鼠腎小球內(nèi)VEGF僅微量表達(dá)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與模型組比較，羅格列酮治療組腎小管間質(zhì)VEGF表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。 4、相關(guān)性分析：TGF-β1表達(dá)與SI、ECM/GA和腎小球病變?cè)u(píng)分均成正相關(guān)(r=0.869，p=0.025；r=0.828，p=0.042；r=0.975，p=0.001)；VEGF表達(dá)與腎間質(zhì)病變?cè)u(píng)分成正相關(guān)(r=0.824，p=0.044)。 結(jié)論： 1、單側(cè)

8、腎切除加尾靜脈分次注射阿霉素法為我們研究如何延緩FSGS的進(jìn)展提供了一個(gè)組間差異小、穩(wěn)定性和重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。 2、TGF-β1在腎組織中的過量表達(dá)參與并促進(jìn)了FSGS的發(fā)生發(fā)展，腎組織TGF-β1的水平可能可以作為判斷FSGS病變程度的指標(biāo)。 3、VEGF介導(dǎo)的腎臟毛細(xì)血管病變是FSGS發(fā)生發(fā)展的重要因素之一。 4、羅格列酮能夠顯著降低蛋白尿，下調(diào)TGF-β1租VEGF的表達(dá)，減輕腎小球硬化、腎間質(zhì)纖維化