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1、目的:通過觀察羅格列酮對(duì)高糖及TGF-β1環(huán)境中培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖、肥大及Col-Ⅳ基因和蛋白表達(dá)的影響,以闡明其腎臟保護(hù)作用機(jī)制,并探討DN的發(fā)病機(jī)制。
方法:用RSG干預(yù)高糖或TGF-β1環(huán)境中培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞,將實(shí)驗(yàn)分為正常組(NG)、高糖組(HG)、TGF-β1刺激組(TGF) 、RSG+正常組(RN)、RSG+高糖組(RH)、RSG+ TGF-β1組(RT)。運(yùn)用MTT比色法測(cè)量細(xì)胞增殖、RT-
2、PCR檢測(cè)TGF-β1和Col-ⅣmRNA的表達(dá)、免疫組化檢測(cè)TGF-β1和Col-Ⅳ蛋白的表達(dá)、倒置顯微鏡觀察腎小球系膜細(xì)胞(GMCs)的形態(tài)變化。
結(jié)果:①高糖可以促進(jìn)腎小球系膜細(xì)胞的增殖,增殖速度先加快后減慢,細(xì)胞體積逐漸增大。②高糖可刺激腎小球系膜細(xì)胞中TGF-β1 、Col-Ⅳ表達(dá)增加,但高糖刺激后腎小球系膜細(xì)胞中TGF-β1的表達(dá)在時(shí)間上早于Col-Ⅳ。③TGF-β1有促進(jìn)腎小球系膜細(xì)胞肥大但抑制其增殖的功能,
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