蕨麻多糖免疫調(diào)節(jié)及抗氧化作用的研究.pdf

1、為探討蕨麻多糖免疫調(diào)節(jié)及抗氧自由基的作用，通過(guò)體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)，利用ELLSA法、MTT法、熒光法、放射免疫法及普通顯微鏡、激光共聚焦掃描顯微鏡、倒置相差顯微鏡、瓊脂糖凝膠電泳、流式細(xì)胞儀等方法與技術(shù)，觀察了蕨麻多糖對(duì)小鼠免疫功能、對(duì)小鼠免疫組織器官或細(xì)胞中氧自由基產(chǎn)生酶活性的影響，體內(nèi)外清除氧自由基的作用以及對(duì)H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的抑制作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)蕨麻多糖可以促進(jìn)ConA和LPS誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞的增殖，并隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)

2、和蕨麻多糖濃度的升高，脾淋巴細(xì)胞的增殖呈一定的正相關(guān)趨勢(shì)。蕨麻多糖能明顯提高環(huán)磷酰胺所抑制小鼠脾臟指數(shù)，但對(duì)胸腺指數(shù)降低無(wú)顯著恢復(fù)和提升作用，ELLSA實(shí)驗(yàn)表明蕨麻多糖均能提高機(jī)體免疫器官IL-6、IFN-γ和TNF-α的分泌。(2)蕨麻多糖濃度為200μg/mL時(shí)能夠升高細(xì)胞內(nèi)信息物質(zhì)GSH含量，但蕨麻多糖對(duì)細(xì)胞內(nèi)GSSG含量影響不顯著。從而通過(guò)提高GSH/GSSG比值調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)偏向還原態(tài)，介導(dǎo)氧化還原信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。(3)隨著

3、蕨麻多糖濃度的遞增和培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞產(chǎn)生的NO信號(hào)分子的含量也在遞增，呈時(shí)間與濃度雙因素作用的正相關(guān)，并且NO通過(guò)激活鳥苷酸環(huán)化酶(GC)，促進(jìn)cGMP合成。(4)蕨麻多糖能影響細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子PGF1α水平，對(duì)細(xì)胞內(nèi)TXB2產(chǎn)生有抑制作用，較小劑量效果比劑量大時(shí)要好，從PGF1α/TXB2比值看，蕨麻多糖能夠調(diào)整體系向PGF1α一端偏移，在機(jī)體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮積極作用。(5)蕨麻多糖能提高受H2O2損傷脾細(xì)胞中NADPH氧

4、化酶活性，能下調(diào)環(huán)磷酰胺抑制小鼠脾臟、胸腺組織中XOD、MPO活性，而對(duì)NOS活性影響無(wú)顯著影響。(6)蕨麻多糖對(duì)體外反應(yīng)體系中由H2O2及其產(chǎn)生的羥自由基(OH)有較好的清除作用，并隨著蕨麻多糖濃度的增加，清除OH效應(yīng)有所增強(qiáng)，對(duì)聯(lián)苯三酚自氧化也有一定的抑制作用。(7)蕨麻多糖能顯著促進(jìn)免疫器官組織內(nèi)GSH的產(chǎn)生，抑制和清除組織中產(chǎn)生的NO、MDA等有害氧自由基。(8)蕨麻多糖能減輕H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞受損的程度，隨著蕨麻多糖濃度的升高，

5、脾淋巴細(xì)胞的形態(tài)及亞結(jié)構(gòu)接近于正常水平。從細(xì)胞流式儀結(jié)果分析，蕨麻多糖能降低細(xì)胞凋亡率，恢復(fù)細(xì)胞正常周期。 結(jié)果表明：蕨麻多糖能影響并介入多種細(xì)胞因子及其它因素作用網(wǎng)絡(luò)，共同協(xié)調(diào)改善機(jī)體免疫系統(tǒng)功能，影響細(xì)胞內(nèi)信息傳遞，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，能抑制氧自由基產(chǎn)生酶，清除組織細(xì)胞內(nèi)氧自由基，影響氧化還原狀態(tài)，提高抗氧化能力，改善和恢復(fù)H2O2引起的脾淋巴細(xì)胞形態(tài)學(xué)的異常，抑制由核酸酶引起的DNA降解，明顯減少細(xì)胞凋亡數(shù)目，恢復(fù)細(xì)胞正常