EPO通過激活PI3K-Akt途徑并上調(diào)HSP70的表達(dá)對(duì)低溫下的心衰大鼠起保護(hù)作用.pdf

1、目的:評(píng)價(jià)紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)對(duì)低溫環(huán)境下心衰大鼠的影響并探討其可能的作用機(jī)制。
　　 方法:采用腹腔注射鹽酸阿霉素(ADR)建立心衰大鼠模型,隨機(jī)分為4組:①對(duì)照組(A組)8只；②心衰組(B組)20只:采用腹腔注射阿霉素制作大鼠心衰模型；③EPO組(C組)14只:造模后給予腹腔注射EPO；LY294002組(D組)18只:造模后尾靜脈注射LY194002,30分鐘后腹腔注射EP0后。觀察10周后

2、檢測(cè)超聲心動(dòng)圖的改變,并測(cè)定大鼠血清中SOD、MDA水平,Western blot測(cè)大鼠心肌組織中HSP70,Akt、pAkt的水平,RT-PCR測(cè)心肌組織中FasmRNA的表達(dá)、熒光定量PCR測(cè)心肌組織中PI3KmRNA的表達(dá),Tunel法測(cè)心肌細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)果:
　　 (1)同對(duì)照組相比,阿霉素致心衰大鼠模型LNEDD增大,EF下降(均p<0.01),符合慢性心衰模型的特征；
　　 (2)心功能水平:心

3、臟超聲顯示:和A組相比,B組LVIDd、LVIDs顯著擴(kuò)大,而C組明顯低于B組,D組則介于B組和C組之間(P<0.01)；和A組相比,B組EF、FS值顯著下降(p<0.01),而C組明顯高于B組,D組則介于B組和C組之間。
　　 (3)組織學(xué)特征:光鏡下可見A組心肌細(xì)胞形態(tài)、胞質(zhì)、間質(zhì)及橫(縱)紋均為正常,心衰組則存在心肌細(xì)胞橫(縱)紋不清,部分區(qū)域肌質(zhì)纖維溶解,胞漿空泡變性,不同程度的炎癥細(xì)胞浸潤和間質(zhì)水腫病變表現(xiàn)。C組以上病

4、變較B組有明顯減輕,心肌細(xì)胞橫(縱)紋存在；D組則介于心衰組和EPO組之間。
　　 (4)氧化能力:與A組相比,B組SOD活力顯著降低(p<0.01),MDA含量明顯升高(p<0.01),而C組SOD活力顯著高于B組(P<0.01),MDA含量明顯低于A組(p<0.01),D組則介于B組和C組之間。
　　 (5)蛋白免疫印跡:與A組相比,C組和D組大鼠心肌組織中pAkt、hsp70顯著增加(p<0.01),B組與A組相較

5、無明顯變化,四組大鼠心肌組織中Akt的水平無顯著差異。
　　 (6)基因表達(dá):與A組相比,B組Fas mRNA的表達(dá)明顯增加(P<0.01),PI3KmRNA的表達(dá)下降(p<0.01),而C組Fas mRNA的表達(dá)較心衰組降低(p<0.01),PI3KmRNA的表達(dá)較B組明顯增加(p<0.01),D組結(jié)果介于B、C組之間。
　　 (7)TIYNEL檢測(cè):與A組相比,B組TUNEL染色陽性細(xì)胞明顯增多(p<0.01),C組

6、TUNEL染色陽性細(xì)胞則顯著低于B組(p<0.01),D組則介于B組和C組之間。
　　 結(jié)論:
　　 1.阿霉素能夠誘導(dǎo)血流動(dòng)力學(xué)障礙、惡化心功能,且此作用可能與氧化應(yīng)激有關(guān)。
　　 2.低溫會(huì)心衰大鼠的心功能進(jìn)一步惡化并導(dǎo)致心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)增加。
　　 3.PI3K/Akt信號(hào)通路是EPO發(fā)揮心肌保護(hù)作用的通路之一,其作用機(jī)制可能是EPO活化P13K/Akt并上調(diào)內(nèi)源性保護(hù)途徑HSP70的表達(dá),對(duì)低溫下