不同類型腦卒中家族聚集性相關(guān)血小板粘附系統(tǒng)基因關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的:
　　顱內(nèi)動脈出現(xiàn)血栓、出血進而影響所供血區(qū)域腦組織正常功能發(fā)揮，這種目前嚴重影響我國人口健康的疾病即為腦卒中，最主要的病因是動脈的粥樣硬化，其次冠心病、高血壓、既往家族發(fā)病史、高血脂等這些因素都可以導(dǎo)致腦卒中的發(fā)生。目前經(jīng)過繁多的流行病學(xué)調(diào)查顯示，腦卒中常常不是單種致病基因所致，生活環(huán)境以及遺傳基因相互影響，促使疾病的發(fā)生。所以想要更好的防治腦卒中，探討遺傳方面的作用機制非常有前景。本課題的選組原則是依據(jù)腦卒中的種類，采用

2、基因表達譜芯片分析，篩選出與不同謄型的腦卒中家族聚集性高度相關(guān)血小板粘附系統(tǒng)基因的SNP，在此基礎(chǔ)上，使用實時定量PCR技術(shù)方法驗證血小板粘附系統(tǒng)基因的啟動子SNP改變相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄活性。最后得出有關(guān)不同類型腦卒中的家族聚集性分子遺傳學(xué)機制，成為腦卒中個體化防治的有力依據(jù)。
　　方法:
　　實驗選取了2012年12月至2013年12月在泰山醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的，10名家族中的腦缺血患者（包括先征者），超過該家族患者腦

3、卒中總數(shù)的75％;10名家族中腦出血患者（包括先征者），超過該家族腦卒中患者總數(shù)的75％;另外選取6名同期在本院健康查體無腦血管病家族史的正常者作為對照組，對照組與實驗組同民族，男女性別比例均衡，年齡相差不超過5歲，且在同一年齡組。病例組和對照組共26例。使用統(tǒng)一的調(diào)查表對選定家系的先證者以及其親屬進行調(diào)查，記錄所有研究對象的一般臨床資料，在征得所有受檢對象同意后進行采樣，采用基因表達譜芯片分析，篩選出分別與腦缺血家族聚集性和腦出血的家

4、族聚集性高度相關(guān)血小板粘附系統(tǒng)基因SNP，在此結(jié)果基礎(chǔ)上，利用實時定量PCR技術(shù)方法證實血小板粘附系統(tǒng)基因的啟動子SNP改變相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄活性。得出有關(guān)不同類型腦卒中的家族聚集性分子遺傳學(xué)機制，成為腦卒中個體化防治的有力依據(jù)。
　　結(jié)果:
　　1.腦出血組和腦缺血組在年齡、吸煙史、飲酒史、糖尿病病史、收縮壓、舒張壓、空腹血糖、血脂水平與對照組相比較，未見統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05）。
　　2.人類外周血全基因組中與不同類

5、型腦卒中相關(guān)的血小板基因包括:GPⅥ、CD63、CD59、CD36、GPⅠbα、GPⅡ b、GPⅢa、PDGF、vWF、TSP、 PECAM-1、ICAM-1、VCAM-1、FP4、PAF、CD62p、TxB2、6-K-PGF1a、 ITGB3。
　　3.實時定量PCR方法驗證與血小板PF4基因結(jié)果:FP4基因在家族聚集性腦缺血組表達降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05); PF4基因在腦出血組的表達也降低，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＜

6、0.05）。
　　4.實時定量PCR方法驗證與血小板CD36基因結(jié)果:CD36基因在家族聚集性腦缺血組表達降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05); CD36基因在腦出血組的表達也降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05）。
　　5.實時定量PCR方法驗證與血小板ITGB3基因結(jié)果:ITGB3基因在家族聚集性腦缺血組表達降低，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05）;在腦出血組表達也降低，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05）。
　　結(jié)論