白血病細胞系來源的樹突狀細胞的誘導、鑒定及凍存方法的研究.pdf_第1頁
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1、青島大學碩士學位論文白血病細胞系來源的樹突狀細胞的誘導、鑒定及凍存方法的研究姓名:王寶中申請學位級別:碩士專業(yè):內(nèi)科學(血液)指導教師:趙春亭李廣倫20040301第一章英文摘要STUDY0NTHEDIFFERENTIATl0N0FK562CELLST0Ⅵ,ARDSDENDRITICCELLSRAPIDLYBYA23187MedicalCollege,QingdaoUniversityABSRACTObjectiveInordertof

2、indasimple,rapidandefficiencywaystOgetdendriticcells,K562celllineswereinducedtobedendriticcellsbyonlycalciumionophore(A23187),A23187combinedwithGM—CSF,orcytokinescocktailsincludingGMCSF、IL4andTNF—aMethodsK562cellswerepla

3、tedat5105/mlin24wellclusterplatesandwereseperatedlyculturedinmediumfor7dayswithcombinationsofcytokinesasfollows:1)A23l87250ng/ml2)A23l87l80ng/mlandrhGM—CSF500U/ml3)rhGMCSFl000U/ml,rhIL4500U/mlandrhTNF—a200U/mlfortestgrou

4、psAllclturesweremaintainedat37“(2in5%C02andahumidifiedatmosphereEveryotherdayhalfdoseoftheinducingagentswereaddedtotestwellsCulturedcellswereobservedbyphasecontrastmicroscopyforthechangeofmorphologyThesufacemoleculeCDla,

5、HLADR,CD54,CD83,CD80andCD86ofinducedDCsweredetectedbyflowcytometryThedifferenceofexpressionratesbeforeandafterinductionCanbeidentifiedbythismeansMTTcolorimetryWasusedtOtesttheabilitythatK562一DCsstimulatedproliferationofa

6、llogeneticnaiveTceilsandtheirinducedcytotoxicityoftcellsResultsDCsCanbegeneratedfromK562cellsbysingleA23187orcombinedcytokinesWefoundthegroupofA23187acquiredmoreDCsthanthegroupofcytokineswithoutA23187within72hours(P005)C

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