長(zhǎng)非編碼RNA MEG3在肝癌細(xì)胞中的功能及分子機(jī)制的初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:研究人類長(zhǎng)鏈非編碼RNA母系印記基因3(MEG3)在肝癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用,并探討其分子機(jī)制。方法:通過(guò)高通量測(cè)序比較肝癌組織和癌旁組織非編碼RNA的表達(dá)變化,篩選出若干肝癌相關(guān)長(zhǎng)鏈非編碼RNA基因(long noncoding RNAs,lncRNAs)。構(gòu)建出這些lncRNAs的真核表達(dá)載體,并篩選出高表達(dá)的穩(wěn)定細(xì)胞株株,運(yùn)用qRT-PCR、Western Blots、RNA-pulldown和表達(dá)譜芯片等技術(shù)探索MEG3的

2、相互作用蛋白及作用機(jī)理。結(jié)果:qRT-PCR方法在多組肝癌組織及其癌旁組織中檢測(cè)若干個(gè)lncRNAs的表達(dá),結(jié)果顯示多數(shù)肝癌組織中多個(gè)lncRNA異常表達(dá),其中MEG3表達(dá)顯著下調(diào)。成功構(gòu)建了若干個(gè)lncRNAs的真核表達(dá)質(zhì)粒,篩選獲得了穩(wěn)定高表達(dá)MEG3基因的SK-Hep-1肝癌細(xì)胞株,表達(dá)譜芯片結(jié)果經(jīng)生物信息學(xué)分析得到若干可能與MEG3發(fā)揮抑制細(xì)胞增殖有影響的基因。結(jié)論:MEG3在多數(shù)肝癌組織中表達(dá)下調(diào),MEG3能顯著地抑制細(xì)胞增殖

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