長鏈非編碼RNA-MEG3對子癇前期滋養(yǎng)細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)換的影響及其作用機制.pdf

1、目的：
　　探索人類長鏈非編碼RNA（lncRNAs）母系印記基因3（MEG3）在疾病子癇前期中的作用及其分子學機制。
　　方法：
　　分別用 qRT-PCR、免疫組織化學和 Western blotting印跡技術(shù)方法檢測MEG3、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)蛋白(E-cadherin、N-cadherin)和轉(zhuǎn)化因子TGF-β介導的TGF-β1/smad通路相關(guān)因子（TGF-β1、smad3、smad7）在30例子癇

2、前期胎盤組織及30例正常胎盤組織中的表達情況；構(gòu)建MEG3真核表達質(zhì)粒和干擾MEG3的siRNA，分別觀察過表達 MEG3和干擾 MEG3對人類滋養(yǎng)細胞HTR-8/SVneo侵襲和遷移功能的影響，qRT-PCR和Western blotting印跡技術(shù)方法分別檢測過表達MEG3和干擾MEG3對人類滋養(yǎng)細胞HTR-8/SVneo上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)蛋白(E-cadherin、N-cadherin、vimentin、zo-1、slug

3、)和其信號通路TGF-β/smad相關(guān)因子（TGF-β1、smad3、smad7）的表達情況。
　　結(jié)果：
　　長鏈非編碼RNA-MEG3在子癇前期胎盤組織中表達低于正常對照，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；子癇前期組患者胎盤組織E-cadherin表達高于正常對照組， N-cadherin低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；細胞轉(zhuǎn)化因子信號通路TGF-β/smad通路相關(guān)因子中TGF-β和smad3在子癇前

4、期胎盤組織中表達高于正常對照，smad7的表達低于正常對照，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；過表達MEG3的HTR-8/SVneo侵襲和遷移功能增強，E-cadherin和zo-1表達降低，N-cadherin、vimentin和轉(zhuǎn)錄因子slug表達增高，TGF-β和smad3表達改變不明顯，smad7表達明顯上升，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；干擾MEG3的HTR-8/SVneo侵襲和遷移功能減弱，E-cadherin和zo-1

5、表達增高，N-cadherin、vimentin和轉(zhuǎn)錄因子表達下降，TGF-β和smad3表達上升不明顯，smad7表達顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；
　　結(jié)論：
　　MEG3子癇前期胎盤中表達下降；子癇前期胎盤滋養(yǎng)細胞出現(xiàn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）下調(diào)；調(diào)節(jié)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的信號通路TGF-β/smad發(fā)生顯著改變；推測在子癇前期中MEG3下降可能通過影響信號通路TGF-β/smad引起滋養(yǎng)細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)換下調(diào)