MicroRNA-23a在膠質瘤中的功能和作用機制研究.pdf

1、MicroRNAs(miRNAs)是一類大小約22個核苷酸、進化上高度保守的非編碼單鏈RNA,它主要是通過與靶mRNA3‘UTR區(qū)非特異性的互補，引起靶mRNA降解或者翻譯抑制，從而在轉錄后水平調節(jié)特定基因的表達。近年來許多研究證明，miRNAs表達水平的異常與人類腫瘤密切相關，miRNAs參與到了細胞發(fā)育的各個階段中，包括細胞的增殖、凋亡和變異等。
　　膠質瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中最常見的惡性腫瘤，病死率高，其發(fā)生機制復雜，目前尚

2、不十分明確。近30年來，膠質瘤的診治有了長足進步。例如，分子生物學和遺傳學研究明確了少數(shù)膠質瘤的性質和生物學行為屬良性，如纖毛型星形細胞瘤，預后好；發(fā)現(xiàn)惡性膠質瘤中對化療、放療敏感的生物學標志，如MGMT基因啟動子甲基化、染色體1p、19q雜合子丟失；癌基因譜（TCGA）發(fā)現(xiàn)多形膠質母細胞瘤（GBM）多于47個基因突變等。其中miRNA作為一種非編碼RNA基因，在膠質瘤中常見失控表達。我們使用高通量芯片初查及Northernblot方法

3、，初步分析了多個潛在癌miRNAs（onco-miRNAs）在膠質瘤組織及相關膠質瘤細胞系中的表達。結果我們發(fā)現(xiàn)，在7對膠質瘤組織中有6例膠質瘤組織miR-23a表達明顯高于其瘤旁組織。隨后擴大樣本Real-timePCR分析了100對膠質瘤中miR-23a的表達。結果顯示：在這100對膠質瘤組織中有79例標本的miR-23a表達水平高于于其相應的瘤旁組織。對腫瘤組織和瘤旁組織進行統(tǒng)計學分析發(fā)現(xiàn)miR-23a在腫瘤組織中的表達明顯高于瘤

4、旁組織。因此，我們推測miR-23a可能作為onco-miRNAs，在膠質瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮了重要調控作用。
　　為探究miR-23a在膠質瘤中的生物學特性，我們選擇引入anti-miR-23a來敲低其在膠質瘤細胞中的表達，然后驗證其對膠質瘤細胞腫瘤相關表型的影響。結果顯示：抑制miR-23a后，U87膠質瘤細胞增殖、侵襲、遷移能力減緩，細胞周期停滯，細胞凋亡增加。隨后我們利用生物信息學及分子生物學方法對其靶基因進行了初步鑒定，