彎曲菌抗體對結腸神經節(jié)作用的初步研究.pdf

1、目的： 腸神經異常性疾病是目前影響嬰幼兒健康的小兒外科常見疾病，患兒腸神經系統(tǒng)的神經節(jié)細胞在病變結腸上發(fā)生數(shù)量、質量和分布上的異常導致一系列的病理生理變化，最主要的臨床表現(xiàn)是便秘，并伴有一系列的消化道癥狀。其基本病理病因是腸段的神經節(jié)變性或者缺如。神經節(jié)變性缺如目前認為主要是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結果。近年來進一步發(fā)現(xiàn)毒素、炎癥等環(huán)境因素直接損傷也是一個很重要的原因。目前已經發(fā)現(xiàn)巨細胞病毒感染可以引起消化道神經節(jié)細胞變性

2、。而對小腸結腸炎的研究發(fā)現(xiàn)細菌感染如：梭狀芽孢桿菌，沙門氏菌等，是導致先天性巨結腸并發(fā)小腸結腸炎的重要原因。由此我們認為細菌感染可能通過細菌毒素或者其他途徑的直接作用造成神經節(jié)細胞變性壞死，進一步導致腸道功能障礙。腸道彎曲菌是革蘭陰性微需氧彎曲菌，存在廣泛，容易傳播，感染率高，被認為是引起全世界人類細菌性腹瀉的主要原因，在我國最近的調查表明1～2歲小兒腹瀉空腸彎曲菌檢出率最高。而空腸彎曲菌可以通過粘附、侵襲、產生毒素和分子模擬機制等作用

3、，與神經組織成份結合，引起局部神經病理損傷如格林巴林綜合癥。但是彎曲菌對腸道神經系統(tǒng)有無損傷作用?通過什么機制導致腸道神經系統(tǒng)損傷?未見文獻報道。本實驗通過免疫組化的方法觀察空腸彎曲菌抗體對結腸正常神經節(jié)細胞和變性壞死的神經節(jié)細胞的作用。從而初步分析腸道彎曲菌抗體對結腸神經節(jié)的毒性作用。 材料與方法： 實驗一：取2005-2006年山大二院行結腸造瘺，腸梗阻，腸套疊手術切除結腸病例30例?；純耗挲g最小為1月，最大為4.5

4、歲，平均年齡為2.234±1.73歲，其中男性18例，女性12例。所有患兒術后病理證實神經節(jié)細胞正常。10﹪的福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋組織切片備用。所有標本隨機分為實驗組和對照組。分別對標本行免疫組化處理，觀察腸道彎曲菌抗體與結腸正常神經節(jié)細胞結合情況。實驗二：本實驗取2005-2006年山大二院行先天性巨結腸手術切除結腸病例30例。其中2例為長段型，2例為短段型，其余為普通型?；純耗挲g最小為2個月，最大為6歲，平均年齡為3.53±

5、1.97歲，其中男性21例，女性9例。所有患兒術前均為鋇灌腸、肛門直腸測壓證實為先天性巨結腸，術后病理證實符合先天性巨結腸的病理表現(xiàn)。分別對標本行免疫組化處理，觀察腸道彎曲菌抗體與不同腸段神經節(jié)細胞結合情況。 兩組實驗的結果以神經節(jié)細胞中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，并根據染色強度和數(shù)量，由病理專家判定。實驗結果用統(tǒng)計學軟件SPSS11.0分析，P<0.05表示有統(tǒng)計學意義。 結果： (1)正常結腸的神經節(jié)細胞內可見空腸

6、彎曲菌抗體與神經節(jié)細胞結合的棕色顆粒，其陽性率為83.3﹪，而對照組很少發(fā)現(xiàn)空腸彎曲菌抗體結合的棕色顆粒，其陽性率為10﹪，實驗組與對照組相比有統(tǒng)計學意義。 (2)巨結腸正常段正常神經節(jié)細胞內和擴張段變性神經節(jié)細胞內可見棕色顆粒，其陽性率分別為為76.7﹪，53.3﹪，擴張段壞死神經節(jié)細胞內少見棕色顆粒，其陽性率分別為6.7﹪。對各組結果進行統(tǒng)計學分析，發(fā)現(xiàn)正常神經節(jié)細胞與變性神經節(jié)細胞，壞死神經節(jié)細胞有統(tǒng)計學意義，壞死神經節(jié)細