星形膠質(zhì)細(xì)胞在癲癇和迷走神經(jīng)刺激抑制癲癇中的形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、目的：篩選前腦中參與急性癲癇發(fā)作和迷走神經(jīng)刺激抑癲的相關(guān)核團(tuán)，觀察其內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞(astrocyte,AS)的分布和形態(tài)變化及其與神經(jīng)元的關(guān)系，探討AS在癲癇發(fā)作和迷走神經(jīng)刺激抑癲中的作用機(jī)制，為癲癇的臨床治療提供理論基礎(chǔ)。 材料和方法：腹腔注射海人酸(kainaticacid，KA)和頸迷走神經(jīng)干刺激術(shù)(VNS)制備動(dòng)物模型。Fos免疫組化染色法，計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞數(shù)，篩選前腦內(nèi)癲癇發(fā)作敏感區(qū)域和參與迷走神經(jīng)刺激抑癲的相關(guān)核團(tuán)；G

2、FAP免疫組化染色觀察AS在上述核團(tuán)內(nèi)表達(dá)和形態(tài)變化；Fos/GFAP免疫組化雙重染色法觀察上述核團(tuán)內(nèi)Fos陽性細(xì)胞與GFAP陽性細(xì)胞的共存關(guān)系；透射電鏡下觀察迷走神經(jīng)刺激對(duì)Pv、Pa內(nèi)AS超微結(jié)構(gòu)的影響。 結(jié)果：1.KA組癲癇發(fā)作，Racine分級(jí)達(dá)Ⅳ-Ⅴ級(jí)；VNS治療組癲癇發(fā)作強(qiáng)度較KA組減弱，Racine分級(jí)達(dá)Ⅲ級(jí)；對(duì)照組、VNS組無癲癇發(fā)作。 2.Fos陽性細(xì)胞數(shù)：前梨狀皮質(zhì)、杏仁體、Pa、Pv：KA組和VNS組

3、均高于對(duì)照組；VNS治療組低于KA組。海馬：VNS治療組低于KA組；VNS組與對(duì)照組未見表達(dá)。齒狀回：VNS治療組與KA組無明顯差異；VNS組與對(duì)照組未見表達(dá)。 3.GFAP陽性細(xì)胞分布：前梨狀皮質(zhì)、齒狀回、Pv：KA組和VNS組均高于對(duì)照組；VNS治療組低于KA組。海馬，杏仁體：KA組高于對(duì)照組；VNS治療組低于KA組；VNS組與對(duì)照組無差異。Pa：VNS組高于對(duì)照組；KA組與對(duì)照組無明顯差異；VNS治療組高于KA組。

4、 4.雙標(biāo)染色顯示Fos和GFAP有共存關(guān)系 1)海馬、齒狀回內(nèi)Fos/GFAP雙標(biāo)細(xì)胞數(shù)：VNS治療組低于KA組。Fos單標(biāo)細(xì)胞數(shù)：海馬VNS治療組低于KA組；齒狀回VNS治療組與KA組無明顯差異。 2)前梨狀皮質(zhì)、杏仁體內(nèi)Fos/GFAP雙標(biāo)細(xì)胞數(shù)：KA組和VNS組高于對(duì)照組；VNS治療組低于KA組；Fos單標(biāo)細(xì)胞數(shù)：KA組高于對(duì)照組；VNS治療組低于KA組；VNS組與對(duì)照組無明顯差異。 3)Pv內(nèi)Fos單標(biāo)

5、細(xì)胞數(shù)、Fos/GFAP雙標(biāo)細(xì)胞數(shù)：KA組和VNS組高于對(duì)照組；VNS治療組低于KA組。 4)Pa內(nèi)Fos/GFAP雙標(biāo)細(xì)胞數(shù)：未見。Fos單標(biāo)細(xì)胞數(shù)：KA組和VNS組均高于對(duì)照組；VNS治療組低于KA組。 5.VNS后Pa，Pv內(nèi)AS細(xì)胞器的超微結(jié)構(gòu)無明顯變化。VNS后Pa內(nèi)在神經(jīng)元和AS胞體交界處可見亮度增高的致密體。 結(jié)論：1)前腦的海馬是癲癇發(fā)作敏感區(qū)域；前梨狀皮質(zhì)、杏仁體、齒狀回、Pv、Pa既是癲癇發(fā)作