短期大劑量他汀逆轉(zhuǎn)兔易損斑塊進(jìn)展試驗(yàn).pdf

1、目的:
　　 1.在新西蘭大白兔的腹主動(dòng)脈構(gòu)建動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊的動(dòng)物模型。
　　 2.通過血管內(nèi)超聲技術(shù)VH—IVUS與病理檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較,評(píng)價(jià)血管內(nèi)超聲技術(shù)在識(shí)別易損斑塊中價(jià)值。
　　 3.通過觀察血脂及主要致炎因子hs—CRP、MMP-3、IL-1、IL-10、TNF—α及ox—LDL等的水平變化,探討血脂及炎癥因子與斑塊穩(wěn)定性的關(guān)系。
　　 方法:
　　 4月齡新西蘭大白兔16只,隨機(jī)

2、分成單純高脂組(6只)和高脂+球囊損傷組(10只)。2周后腹主動(dòng)脈內(nèi)膜球囊損傷術(shù),術(shù)后繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)10周,總共12周后。兩組兔分別于實(shí)驗(yàn)開始、球囊損傷后及處死動(dòng)物前作血液生化檢查。禁食12h以上,抽取空腹血,留取自凝血檢測(cè)血脂水平。同時(shí)采用ELISA法測(cè)定血清高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP),腫瘤壞死因子(TNF—α),氧化型低密度脂蛋白(ox—LDL),白介素1(IL—1),白介素10(IL-10),基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)的

3、濃度。12周處死前高脂+球囊損傷組(8只)進(jìn)行血管內(nèi)超聲檢查。兩組實(shí)驗(yàn)兔處死后,切取左腎動(dòng)脈向遠(yuǎn)端的5cm長(zhǎng)動(dòng)脈,切成3mm厚,石碚包埋,5um的組織切片固定在載玻片上,分別進(jìn)行病理學(xué)及免疫組織化學(xué)染色檢查。
　　 結(jié)果:
　　 1.實(shí)驗(yàn)過程中,高脂+球囊損傷組有兩只兔意外死亡。
　　 2.兩組兔血生化指標(biāo)和炎性因子水平檢測(cè)結(jié)果
　　 與基礎(chǔ)狀態(tài)相比,建模前后兩組兔血脂各項(xiàng)指標(biāo)比較均有顯著性差異,只有LD

4、L-c和Fig在處死前進(jìn)一步升高,與球囊損傷時(shí)相比有顯著差異,但兩組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?；A(chǔ)狀態(tài)和球囊損傷時(shí),兩組間對(duì)比hs—CRP、MMP-3、IL-1、IL-10、TNF—α、ox—LDL水平無明顯差異,在十二周處死前高脂+球囊損傷組與單純高脂組比較,hs—CRP、MMP-3、IL-1、IL—10、TNF—α、ox-LDL,水平明顯升高(P=0.00)。而且通過動(dòng)態(tài)觀察血清炎性因子的情況,發(fā)現(xiàn)兩周后兩組的hs—CRP、IL-1、

5、IL—10、TNF—α、ox—LDL水平較基礎(chǔ)均有升高,但是與單純高脂組不同,12周處死前高脂+球囊損傷組與兩周時(shí)對(duì)比都有進(jìn)一步提高,除IL—1的(P<0.05),其余(P均<0.01),而MMP-3在單純高脂組動(dòng)態(tài)觀察并沒有明顯變化,高脂+球囊損傷組MMP-3在兩周時(shí)雖有升高但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,12周處死前有明顯升高(P<0.01)
　　 3.虛擬組織學(xué)-血管內(nèi)超聲(VH—IVUS)檢查及與病理組織學(xué)對(duì)比
　　 在球囊損

6、傷+高脂飲食組,8只實(shí)驗(yàn)兔均進(jìn)行了血管內(nèi)超聲(IVUS)檢查,并與病理檢查的結(jié)果進(jìn)行比較,總共276個(gè)動(dòng)脈粥樣硬化性斑塊被分析,對(duì)于不同斑塊的特異性,敏感性和陽性預(yù)測(cè)值被總結(jié),VH—IVUS對(duì)非鈣化和鈣化的薄帽纖維斑塊(TCFA)的敏感性是83.3和92.9％,VH—IVUS能正確的識(shí)別83.3和81.3％的非鈣化和鈣化的纖維斑塊(FA),對(duì)于致病性內(nèi)膜增生(PIT),VH—IVUS識(shí)別PIT的敏感性和陽性預(yù)測(cè)值分別是81.7和75.4

7、％。以上結(jié)果提示VH—IVUS對(duì)于識(shí)別TCFA具有高度的敏感性和特異性。
　　 病理組織學(xué)與VH—IVUS對(duì)不同的組織成份識(shí)別存在明顯的相關(guān),線性回歸分析顯示,在斑塊成份分析方面,病理組織學(xué)與虛擬組織學(xué)(VH—IVUS)之間存在明顯相關(guān):纖維組織(R=0.845,P<0.001),纖維脂肪組織(R=0.791,P<0.001),壞死鈣化組織(R=0.793,P<0.001),并且壞死核心(R=0.731,P<0.001)。

8、>　　 在內(nèi)彈力膜和中外彈力膜邊界的測(cè)量方面,不同的觀察者之間變化很小,線性回歸分析顯示測(cè)量值明顯相關(guān)各為(R=0.993和0.996)。
　　 4.兩組病理學(xué)測(cè)量結(jié)果之比
　　 高脂與球囊損傷結(jié)合組12周時(shí)與單純高脂組對(duì)比,除內(nèi)中膜厚度變化不明顯外,斑塊厚度,纖維帽厚度及斑塊厚度與內(nèi)中膜厚度比值經(jīng)分析,差異有非常顯著性意義(P<0.01)。
　　 5.兩組免疫組化染色對(duì)比
　　 高脂+球囊損傷組的斑塊

9、內(nèi)有大量染色陽性CD68(巨噬細(xì)胞)聚集,主要集中于內(nèi)膜近管腔面的數(shù)層細(xì)胞內(nèi)及外膜處,而單純高脂組幾乎不著色,示炎癥較輕；α—actin肌動(dòng)蛋白兩組均有染色,與單純高脂組比,高脂+球囊損傷組的染色稍淺,兩組CD68巨噬細(xì)胞和α—actin肌動(dòng)蛋白陽性面積比有明顯區(qū)別(P<0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.通過高脂+球囊損傷兔腹主動(dòng)脈內(nèi)膜,成功建立了易損斑塊的動(dòng)物模型。
　　 2.通過動(dòng)態(tài)觀察血脂水平和炎性因子