激活腦星形膠質細胞保護神經(jīng)元的實驗研究.pdf

1、華中科技大學碩士學位論文激活腦星形膠質細胞保護神經(jīng)元的實驗研究姓名：徐江華申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學指導教師：梅元武20080524華中科技大學碩士學位論文華中科技大學碩士學位論文2中文摘要中文摘要在腦缺血的研究中發(fā)現(xiàn)，局灶性腦缺血能激活局部AS使其活性增強并產生神經(jīng)生長因子發(fā)揮腦保護作用，若其它無缺血部位AS也能激活產生神經(jīng)營養(yǎng)因子，將更有效的保護缺血半暗帶的神經(jīng)元。本實驗探討藥物激活正常AS保護神經(jīng)元。目的：目的：離體培養(yǎng)AS

2、，觀察藥物能否激活AS；明確藥物對AS內皮素受體B表達有何影響。方法：方法：1出生48小時內的健康SD大鼠，分離大腦皮層并進行AS體外培養(yǎng)。原代細胞經(jīng)純化后純度達到95%以上者用于實驗。2細胞毒性實驗初篩藥物對AS的安全濃度。取經(jīng)3次傳代培養(yǎng)的大鼠乳鼠AS，隨機分為實驗組和對照組。對照組加入相同體積的培養(yǎng)基，各實驗組中分別加入不同濃度藥物，MTT比色法對AS進行藥物毒性分析。根據(jù)分析結果確定本實驗的安全藥物濃度。3流式細胞術測定細胞增殖

3、激活情況。將AS隨機分為對照組和藥物組。對照組加入相同體積的培養(yǎng)基，實驗組分別在細胞培養(yǎng)24小時、48小時、72小時后加入不同濃度藥物，加入藥物后繼續(xù)培養(yǎng)24小時。流式細胞儀測細胞周期，結合增殖指數(shù)（PrI值）了解AS的增殖激活情況。4熒光免疫法測定藥物對內皮素受體B表達的影響。將AS隨機分為對照組和藥物組。對照組加入相同體積的培養(yǎng)基，藥物組加入不同濃度藥物作用24小時后固定細胞爬片，封閉并加入內皮素受體B抗體過夜，加熒光二抗，最后PI