人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)體系的改良與攜帶α-地中海貧血基因人胚胎干細(xì)胞系的建立.pdf

1、本研究著重于人ES細(xì)胞培養(yǎng)體系的改良和建立攜帶α-地中海貧血遺傳疾病基因人ES細(xì)胞系，以期構(gòu)建高效穩(wěn)定的人ES細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)平臺(tái)和為α-地中海貧血的體外基因治療提供生物學(xué)材料?！　”狙芯繉?duì)人ES細(xì)胞培養(yǎng)體系進(jìn)行了改良，包括：囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(innercellmass，ICM)的有效分離、人ES細(xì)胞培養(yǎng)液成分的改良和人ES細(xì)胞冷凍保存效率的提高，以建立高效穩(wěn)定的人ES細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)平臺(tái)，為將來(lái)治療性克隆的實(shí)施奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，應(yīng)用改良ES

2、細(xì)胞培養(yǎng)體系建立三株人ES細(xì)胞系。該技術(shù)在臨床的廣泛應(yīng)用可為出生的試管嬰兒儲(chǔ)備遺傳背景相近的ES細(xì)胞，旨在評(píng)價(jià)機(jī)械法分離囊胚ICM的效率，以及比較機(jī)械法和免疫外科法分離ICM后人ES細(xì)胞原代克隆的形成率；評(píng)估采用含血清替代物的培養(yǎng)液與含胎牛血清的培養(yǎng)液對(duì)人ES細(xì)胞生長(zhǎng)速率的影響；探討玻璃化冷凍法對(duì)人ES細(xì)胞的冷凍效率；使用常規(guī)試管嬰兒術(shù)中正常受精，不適于移植或冷凍的低質(zhì)量胚胎建立核型正常、可在體外保持未分化狀態(tài)并具無(wú)限分化潛能的人ES細(xì)