SIRT1對(duì)燒傷誘導(dǎo)的心肺損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、大面積燒傷導(dǎo)致的多臟器功能損傷是嚴(yán)重?zé)齻笞钪饕牟l(fā)癥之一，其中肺臟、心臟損傷位居前兩位。由于嚴(yán)重?zé)齻麑?duì)機(jī)體造成損傷的因素及機(jī)體的反應(yīng)調(diào)控機(jī)制均比較復(fù)雜，臟器損傷發(fā)生發(fā)展的病理過程及分子調(diào)控機(jī)制仍未完全明確，加之目前仍無有效的方法能夠緩解嚴(yán)重?zé)齻麑?dǎo)致的臟器損傷。因此，嚴(yán)重?zé)齻笮?、肺損傷的保護(hù)研究一直是燒傷救治過程中亟需解決的重點(diǎn)問題之一。
　　沉默信息調(diào)節(jié)因子1（Silent information regulator typ

2、e-1，SIRT1）是一種Ⅲ型去乙?；福瑥V泛的存在于多種組織和細(xì)胞中，參與了機(jī)體多種生理及病理過程。研究發(fā)現(xiàn)，SIRT1在失血性休克、缺血再灌注引起的心臟損傷以及脂多糖、腸毒素 B引起的急性肺損傷中起一定的保護(hù)作用。因此我們假設(shè)，SIRT1在嚴(yán)重?zé)齻T導(dǎo)的心、肺損傷中可能發(fā)揮保護(hù)作用。本研究在動(dòng)物模型及細(xì)胞水平上，通過對(duì)SIRT1表達(dá)及功能的調(diào)控，探索SIRT1在嚴(yán)重?zé)齻麑?dǎo)致的心、肺損傷中的保護(hù)作用及分子調(diào)控機(jī)制。
　　方法：<

3、br>　　1.建立SD大鼠30％體表總面積（Total body surface area，TBSA）Ⅲ°燙傷誘導(dǎo)的心臟損傷動(dòng)物模型，通過腹腔注射白藜蘆醇上調(diào)大鼠心臟SIRT1的表達(dá)水平，通過觀察心臟病理損傷程度、血清中心肌酶含量、cleaved caspase3以及炎癥因子的表達(dá)水平，探討SIRT1在嚴(yán)重燙傷誘導(dǎo)的心臟損傷中的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　2.建立SD大鼠30% TBSAⅢ°燙傷誘導(dǎo)的間接肺損傷動(dòng)物模型，使用白藜蘆醇上調(diào)

4、SIRT1的表達(dá)水平，通過觀察肺組織病理損傷程度、肺泡灌洗液蛋白含量、cleaved caspase3和炎癥因子的表達(dá)以及肺組織免疫熒光雙染檢測(cè)，探討SIRT1在嚴(yán)重燙傷誘導(dǎo)的間接肺損傷中的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　3.使用30%TBSAⅢ°燙傷大鼠血清刺激大鼠原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞（pulmonary microvascular endothelial cells，PMVECs），模擬PMVECs處于燒傷微環(huán)境，通過調(diào)控SIRT1表達(dá)

5、及功能，觀察PMVECs凋亡及MAPK信號(hào)通路活化程度的變化；并進(jìn)一步干預(yù)MAPK信號(hào)通路的活性，觀察SIRT1對(duì)PMVECs凋亡的影響，探討SIRT1對(duì)燒傷血清誘導(dǎo)的PMVECs凋亡的分子調(diào)控機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠在嚴(yán)重燙傷早期即可出現(xiàn)心臟損傷，且心臟組織的SIRT1表達(dá)增高；白藜蘆醇可進(jìn)一步上調(diào)SIRT1的表達(dá)，進(jìn)而減輕嚴(yán)重燙傷導(dǎo)致的心臟病理損害程度，降低血清中LDH、CK的含量，減少心肌細(xì)胞的凋亡以及抑制心肌

6、細(xì)胞炎癥因子表達(dá)。
　　2.嚴(yán)重燙傷可引起大鼠間接性肺損傷，肺部?jī)?nèi)皮細(xì)胞（Endothelial cells，ECs）凋亡是導(dǎo)致肺損傷的重要原因，且大鼠肺組織SIRT1的表達(dá)在嚴(yán)重燙傷6h后明顯增高；當(dāng)使用白藜蘆醇進(jìn)一步上調(diào)SIRT1的表達(dá)后，明顯減輕了嚴(yán)重燙傷引起肺部病理損害程度，降低肺ECs的通透性，抑制肺組織內(nèi)炎癥因子表達(dá)，以及減少肺ECs的凋亡。
　　3.大鼠原代PMVECs在燒傷血清刺激下細(xì)胞凋亡明顯增加，而細(xì)胞內(nèi)

7、SIRT1表達(dá)降低；使用白藜蘆醇上調(diào)SIRT1的表達(dá)可明顯抑制燒傷血清誘導(dǎo)的PMVECs凋亡；抑制SIRT1表達(dá)可以增加燒傷血清誘導(dǎo)的PMVECs凋亡；SIRT1抑制燒傷血清誘導(dǎo)的PMVECs凋亡是通過抑制p38 MAPK信號(hào)通路的活化實(shí)現(xiàn)的。
　　結(jié)論：
　　SIRT1在嚴(yán)重?zé)齻T導(dǎo)的心、肺損傷中起著重要的保護(hù)作用，其保護(hù)作用主要是通過減少炎癥因子釋放和抑制細(xì)胞凋亡來實(shí)現(xiàn)的；此外，SIRT1通過抑制p38 MAPK信號(hào)通路